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小弟近期做冰冻切片一个月了,但是还是出不到什么好的成果。反复思考原因是在进行组织处理的时候出现了问题,想和大家讨论一下。
首先我的处理方法是速冻:
1)把组织取出,用去离子水漂洗表面的血。然后用纸吸干表面的水分。
2)OTC包埋
3)直接放进-80°C冰箱速冻。
这个方法出现的问题是肝和肾出现很多冰晶,到时很难出成果。
然后想请问各位战友一些问题:
1.在取出组织之后,可以不漂洗,直接擦干后OTC包埋吗?那样会不会导致有很多红细胞残留在组织内?
2.-80°C冰箱直接速冻,放置时间的长短会不会和冰晶产生的多少有影响呢?
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回复:时间:2016-09-09
Justin001有冰晶不是导致实验做不出来的原因,冰晶只是会刺破细胞,破坏组织形态。避免冰晶形成的方法是蔗糖沉底脱水,脱水完成后再OCT包埋冷冻保存请问蔗糖沉水要梯度脱水吗?例如对肝、肾这类水多的组织。我近期主要做HE染色,冰晶过多导致细胞形态都看不清楚了QAQ
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回复:时间:2016-09-07
展开引用Bolic_WuJustin001有冰晶不是导致实验做不出来的原因,冰晶只是会刺破细胞,破坏组织形态。避免冰晶形成的方法是蔗糖沉底脱水,脱水完成后再OCT包埋冷冻保存请问蔗糖沉水要梯度脱水吗?例如对肝、肾这类水多的组织。我近期主要做HE染色,冰晶过多导致细胞形态都看不清楚了QAQ......一般是20%后30%梯度脱水
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回复:时间:2016-09-05
展开引用Justin001Bolic_WuJustin001有冰晶不是导致实验做不出来的原因,冰晶只是会刺破细胞,破坏组织形态。避免冰晶形成的方法是蔗糖沉底脱水,脱水完成后再OCT包埋冷冻保存请问蔗糖沉水要梯度脱水吗?例如对肝、肾这类水多的组织。我近期主要做HE染色,冰晶过多导致细胞形态都看不清楚了QAQ一般是20%后30%梯度脱水......谢谢这位战友~
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