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样品是血液，想要从血清中提纯一种蛋白，实验设计是过两个柱子，DEAE-FF预装柱+S-SepharoseFF预装柱，两个柱子都是20ml，上样量5ml的柱子……做实验过程发现样品的浓缩是一个大麻烦事情，还有一个就是过第二个柱子之前对样品的处理（置换缓冲溶液+浓缩），实验室有GE的HitrapDesalting脱盐柱，5ml的，想请教一下各位前辈，怎么使用脱盐柱进行缓冲液的置换？具体怎么步骤？？谢谢…………
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回复：时间：2016-10-24
缓冲液为要置换到的缓冲液。步骤：1，用缓冲液平衡2，上样3，继续用缓冲液洗脱1.5CV以上。一般蛋白在1/3柱体积出峰。注意：1，上样量不超过20%柱体积，也就是5ml柱子上样量一般小于1ml,不过试验很快，一次试验10min搞定。2，脱盐柱无法起到浓缩效果，会一定程度稀释样品。
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