细胞转染

Yeast Media

YEPD(non-selection)

-1%yeastextract
-2%peptone
-1.5%agar(ifneededforplates)

Afterautoclavingaddglucoseto2%byadding100mlof20%solutiontoeachlitremedia.

SYNTHETICMEDIA(selectivemedia)

-0.67%yeastnitrogenbasewithoutaminoacids(Difco)0919153
-1.5%agar(ifneededforplates).Alsoadd1pelletofNaOHperlitreofagartoavoidmushyplates.

Afterautoclavingadd100mlof20%glucose(orgalactose)solutionand100mlof10XDropoutsolutiontoeachlitremedia.

10XDROPOUTSOLUTION

-L-Isoleucine300mg/L
-L-Valine1500mg/L
-L-Adeninehemisulfatesalt200mg/L
-L-ArginineHCl200mg/L
-L-LysineHCl300mg/L
-L-Methionine200mg/L
-L-Phenylalanine500mg/L
-L-Threonine2000mg/L
-L-Tyrosine300mg/L
-L-Uracil200mg/L
-L-HistidineHClmonohydrate200mg/L*SigmaH9511
-L-Leucine1000mg/L*SigmaL1512
-L-Tryptophan200mg/L*SigmaT0271

*The10XDropoutsolutiondoesnotcontainHistidine,LeucineandTryptophan.Thesecomponentsareusedtomakeselectivemediatoselectforyeasttransformants.

**Abetteroptionistopurchaseselectivedropoutaminoacidmix.CSM-His,-Leu,-Trp--BIO101(Cat.10427-100)andaddeitherHis,LeuorTrpasneeded.

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