2017-08-30新手一枚，想知道怎么养好胚胎干细胞

展开引用实验先呆 第一次养胚胎干细胞，复苏的时候复苏到六孔板中的其中一个孔中，结果发现细胞很多，于是换了两个6cm皿养，结果越养越少。很纳闷。请教了几位蚂蚁淘的前辈们，于是乎有几个问题还是在心中，希望还能在这里能得到答复。1。培养细胞的时候是一定要在六孔板中吗？那一般复苏细胞的时候复苏到几个孔中呢? 2.细胞的密度是大概多少呢? 3.我用的基质胶，说明书上是1;80，结果在孵箱放了一小时后，发现没有想象的胶凝固的样子，没有像果冻那样。反而还是液体状的，这是能用还是不能用呢？4.如果基质胶一开始就铺好，等到传代的时候再铺，中间每天都在换液，不容易污染吗?5。刚复苏的细胞，一直漂浮在培养液里，是慢慢地细胞才会贴在基质胶上么，然后才会慢慢在基质胶上生长么？......

我养的是间充质干细胞，不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面，用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了，贴壁后就开始生长，还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因：1.缺少生长因子，生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来，因为干细胞有细胞密度的要求。

展开引用绿野仙山我养的是间充质干细胞，不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面，用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了，贴壁后就开始生长，还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因：1.缺少生长因子，生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来，因为干细胞有细胞密度的要求。......您好，咨询一下您，您在进行间充质干细胞传代时，铺板密度大概是多少？

如果我用的是58的平皿长满，就按照1：5的比例传代

展开引用绿野仙山我养的是间充质干细胞，不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面，用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了，贴壁后就开始生长，还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因：1.缺少生长因子，生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来，因为干细胞有细胞密度的要求。......间充质干细胞是不是也要用基质胶先包被呢？加到皿里的基质胶在两个小时之后是不是就变成果冻状的了？我的基质胶加进去，两小时以后还是液体状，加进去多少，还能吸出多少，这个胶是起作用了没？

展开引用绿野仙山我养的是间充质干细胞，不知道对你有没有用。细胞培养不一定是要在孔板里面，用什么东西去培养是取决于自己要求。细胞一般是两小时就可以贴壁了，贴壁后就开始生长，还要确认分离培养的是不是自己所需要的干细胞。如果越传代越少的话可以考虑原因：1.缺少生长因子，生长条件不合适。2.是否染菌。3.细胞密度是不是太低了导致其生长不起来，因为干细胞有细胞密度的要求。......干细胞的密度要求大概是多少呢

实验先呆间充质干细胞是不是也要用基质胶先包被呢？加到皿里的基质胶在两个小时之后是不是就变成果冻状的了？我的基质胶加进去，两小时以后还是液体状，加进去多少，还能吸出多少，这个胶是起作用了没？我不是等到它长好了才放到另一个皿的，是在复苏的第二天就换皿了。一开始我以为干细胞在培养液里悬浮生长，贴壁到基质胶上的细胞是分化的细胞，结果我每天都换基质胶，每天都要把细胞导入一个新的皿里，细胞就越来越少了？请问，前辈我的做法和想法有什么错误？

你的要确定这个干细胞类型在这个培养基里面是悬浮的还是贴壁的。我还有一种情况就是分离干细胞的时候，需要两种细胞，在同一种培养里面一个贴壁，一个悬浮。过夜后收集上清离心，把悬浮的细胞收集后换成另外一种培养基它是贴壁的

然后贴壁的那个干细胞做分化鉴定来确定它就是自己想要的细胞

你的意思就是说干细胞有的是贴壁的，有的是悬浮培养的，先要确定是哪种的？我的是人体胚胎干细胞

有没有人养过内皮祖细胞