干细胞

2017-08-20求助!冻存的间充质干细胞可以直接做pcr吗

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各位大神,我将培养后的间充质干先液氮冻存了,现在想提rna,可以直接离心做吗?我看有人说要在冰上融化,融化后立即四度离心,离心之后就可以按正常步骤提取了。可是我冻存细胞的时候里面加入了dmso血清培养基,不需要pbs洗一下再提吗?
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回复:时间:2017-09-01

可以离心以后,pbs 洗一次?

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回复:时间:2017-08-24

合肥周三可以离心以后,pbs洗一次?那要先将融化后的液体从冻存管中吸出离心,然后pbs洗一下再离心?大神你做过吗

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回复:时间:2017-08-22

是可以提RNA的,但RNA质量堪忧,尤其是目的基因RNA丰度较低时,PCR有可能检测不到目的基因。建议复苏成功后,用生长良好的活细胞来提RNA。

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回复:时间:2017-08-24

lindamo760808是可以提RNA的,但RNA质量堪忧,尤其是目的基因RNA丰度较低时,PCR有可能检测不到目的基因。建议复苏成功后,用生长良好的活细胞来提RNA。可是这个细胞是经过处理的,再养就不是那个时间点了……

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回复:时间:2017-08-23

没听说冰上融化的,可能是我孤陋寡闻了,建议提RNA还是常规融化

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回复:时间:2017-08-26

七更七子石没听说冰上融化的,可能是我孤陋寡闻了,建议提RNA还是常规融化为什么啊

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回复:时间:2017-08-24

极速溶解是减少溶解时产生的冰晶损伤细胞。你要是直接做RNA,细胞损伤后难免会有RNA酶分解RNA。

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回复:时间:2017-08-30

七更七子石极速溶解是减少溶解时产生的冰晶损伤细胞。你要是直接做RNA,细胞损伤后难免会有RNA酶分解RNA。所以要在37°溶解?

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回复:时间:2017-08-26

是的