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回复:时间:2010-11-22
您好,请问可以提供点HCC827细胞吗?我们养的,但是复苏都没复苏活,贴壁的很少很少,不知道怎么回事,或者也把HCC827细胞的说明书给我一份,谢谢了,我的邮箱874754106@qq.com版主cheff0412留言:请不要公开个人联系方式,建议私下PM
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回复:时间:2010-11-23
huangmeng1990815同问,最近也在养这个细胞,但是一消化下来细胞就成团了,也吹不开,长的时候就成一堆一堆的了同求HCC827的详细培养方法我也遇到同样的问题,请问有什么解决办法吗?谢谢!版主cheff0412留言:以上回帖已阅,如有问题请联系本版版主
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回复:时间:2010-11-22
你好,我最近也在养HCC827,但很难传代,好不容易复苏成功了,但在分瓶传代的时候又死光了,后来再怎么复苏都没成功,你能否发发一份其培养说明书给我,万分感谢617162935@qq.com
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回复:时间:2010-11-19
似乎没那么难吧。养过这细胞,没多大印象。鉴于以上问题,我鉴于多加些胰酶(PBS漂洗后,一个T25的瓶子加1ml以上,我一个T25的习惯性0.5ml),延长消化时间,吹打的时候力度小些,离心力降到100g(是离心力,不是转速,转速看离心机,常规的大离心机600~800rpm),轻轻吹散传代。
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回复:时间:2010-11-18
展开引用liupeng0215似乎没那么难吧。养过这细胞,没多大印象。鉴于以上问题,我鉴于多加些胰酶(PBS漂洗后,一个T25的瓶子加1ml以上,我一个T25的习惯性0.5ml),延长消化时间,吹打的时候力度小些,离心力降到100g(是离心力,不是转速,转速看离心机,常规的大离心机600~800rpm),轻轻吹散传代。......T25的瓶子加1ml胰酶-EDTA,放在孵箱中3min,直接一大块细胞团掉下来,轻轻吹打吹不开,用力大了细胞损伤之后不贴壁。一般传代的时候不离心,这个对细胞会有影响吗?
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回复:时间:2010-11-21
树缝里的太阳T25的瓶子加1ml胰酶-EDTA,放在孵箱中3min,直接一大块细胞团掉下来,轻轻吹打吹不开,用力大了细胞损伤之后不贴壁。一般传代的时候不离心,这个对细胞会有影响吗?是不是你细胞状态不好啊。少加点胰酶,不离心问题不大,尤其高比例传代更不是问题了。有没有照片啊,上传几张看看
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回复:时间:2010-11-18
liupeng0215是不是你细胞状态不好啊。少加点胰酶,不离心问题不大,尤其高比例传代更不是问题了。有没有照片啊...实验室没有能拍照的显微镜…还请给我点时间,找个显微镜~
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回复:时间:2010-11-14
我25ml培养瓶加1.0ml胰酶-EDTA室温下孵育5min~8min,吸掉胰酶,也是成团掉的,其他细胞成团掉的加培养液很容易吹打开,HCC827就是很难吹打开,一般2-3细胞结在一起,不过传代生长还是不错,就是不均匀,不知道大家没有更好的办法
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回复:时间:2010-11-20
嗯,上午10点左右传代,等到下午6-7点就已经开始贴壁生长了,但是这个细胞生长比较慢,不要着急。血清的作用主要是加快细胞贴壁速度,所以可以适当把血清加大浓度的
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