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我想将要研究的启动子插入到荧光素酶报告基因载体中,并稳定转染到MCF-7细胞。我看到一些文献用到pGL3的载体,但是几乎都是做的瞬时转染。我想请问一下pGL3载体能用做稳定转染吗?或者什么载体适合呢?谢谢指教!
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回复:时间:2008-09-06
Promega公司的pGL3系列载体,无论是Basic 型还是Promoter型都只能做瞬时转染,而不能用来做稳定转染,如要将上述载体用作稳定转染,必须引入G418抗性基因表达盒或其他筛选标志(如Hygromycin,puromycin),或直接使用泛基诺公司的相关载体.
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回复:时间:2008-09-06
谢谢!:) 我还想请问一下,通过共转染另一个携带抗性基因的载体来筛选稳定转染的细胞,是不是不如转染本身带有报告基因和抗性基因的载体成功率高呢?我在网上查了一下您说的泛基诺公司没有搜到,可不可以再请您指教用这个公司的那个载体比较好呢?我的课题是通过荧光素酶报告基因载体筛选具有上调启动子效率的化合物。
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