逆转录试剂盒
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15联呼吸道病毒荧光标记PCR检测试剂盒
15联呼吸道病毒荧光标记PCR检测试剂盒,是一种用来检测疾病的诊断试剂。
- 中文名
- 15联呼吸道病毒荧光标记PCR检测试剂盒
- 针对病症
- 流行性感冒病毒和流行性感冒病等
- 混合反应
- 分成三组进行PCR
- 国内推出
- 2012年12月在国内市场推出
- 保存温度
- -20℃
- 注意事项
- 应尽量避免反复冻融
15联呼吸道病毒荧光标记PCR检测试剂盒产品简介
试剂盒针对流行性感冒病毒A型和流行性感冒病毒B型(FluA和FluB)、呼吸道合胞病毒A(RSVA)和呼吸道合孢病毒B(RSVB)、腺病毒(AdV)、人偏肺病毒(MPV)、冠状病毒OC43(OC43)、冠状病毒229E/NL63(229E/NL63)、副流感病毒1型(PIVl)、副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒3型(PIV3)、副流感病毒4型(PIV4)、鼻病毒A/B/C(HRV)、肠道病毒(HEV)、和人博卡病毒1/2/3/4(HBoV)共15种常见呼吸道病毒进行检测。可以应用于季节性呼吸道疾病的病原学检测,突发疫情状态下的疫源病原体的排除检测,结核病人的伴随呼吸道病原体感染检测,免疫低下患者的呼吸道病原体机会感染检测以及区域网络病原体监测等场合。
该试剂盒针对各型病原体设计了独特的扩增引物,分成三组进行PCR混合反应,避免了多重反应相互之间的干扰,同时每组反应内部加设内参照,可以区分真实阴性反应或者由于反应体系不正确导致的假阴性反应。PCR体系中采用Premix技术,预混合液中直接含有rTaq、反应Buffer、dNTP等,加入模板即可进行反应。
PCR引物中还设计了独特的荧光标记物,产物可经由目前普及使用的ABI3730测序仪进行仪器性的图谱判读,避免了人眼识别的经验差异的干扰。在有经验的实验室内,各组PCR产物也可以直接进行琼脂糖凝胶电泳,经EB染色后,直接在紫外下观察和记录结果,本手册中也描述了这样的流程。
该试剂盒由“博易医学”研发,目前已经过临床初步验证,检测灵敏度高,比国际同类产品质量相当,价格仅为其几分之一,可在国内多数场合被接受应用。预计于2012年12月在国内市场推出。
15联呼吸道病毒荧光标记PCR检测试剂盒附件
15联呼吸道病毒荧光标记PCR检测试剂盒
(BE-R15FPCRVersion1.0,50次量)
应用范围
本试剂盒用于人鼻咽拭子(鼻腔擦拭液)、鼻咽分泌物和支气管肺泡灌洗液标本中15种常见呼吸道病毒的定性检测。15种呼吸道病毒为:
流行性感冒病毒A型(FluA)流行性感冒病毒B型(FluB)呼吸道合胞病毒A(RSVA)呼吸道合孢病毒B(RSVB)腺病毒(AdV)人偏肺病毒(MPV)冠状病毒OC43(OC43)冠状病毒229E/NL63(229E/NL63)副流感病毒1型(PIVl)副流感病毒2型(PIV2)副流感病毒3型(PIV3)副流感病毒4型(PIV4)鼻病毒A/B/C(HRV)肠道病毒(HEV)人博卡病毒1/2/3/4(HBoV)腺病毒Adv:可以检测大部分的B、C、E亚群和部分A、D亚群。
流行性感冒FluA:本引物可以检测高致病性禽流感H5N1和2009年H1N1亚型。
检测原理
聚合酶链式反应(PCR)DNA扩增技术具有强特异性和高灵敏度的特点,但是凝胶电泳判读PCR产物容易受人经验影响与干扰。本试剂盒检测主要分为2个步骤:分三组进行多重PCR扩增目标DNA;目标DNA扩增获得的荧光标记产物合并进行ABI3730毛细管电泳图谱检测。
本试剂盒针对流行性感冒病毒A型和流行性感冒病毒B型(FluA和FluB)、呼吸道合胞病毒A(RSVA)和呼吸道合孢病毒B(RSVB)、腺病毒(AdV)、人偏肺病毒(MPV)、冠状病毒OC43(OC43)、冠状病毒229E/NL63(229E/NL63)、副流感病毒1型(PIVl)、副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒3型(PIV3)、副流感病毒4型(PIV4)、鼻病毒A/B/C(HRV)、肠道病毒(HEV)、和人博卡病毒1/2/3/4(HBoV)设计了独特的扩增引物,分成三组进行PCR混合反应,避免了多重反应相互之间的干扰,同时每组反应内部加设内参照,可以区分真实阴性反应或者由于反应体系不正确导致的假阴性反应。
PCR体系中采用Premix技术,预混合液中直接含有rTaq、反应Buffer、dNTP等,加入模板即可进行反应。
PCR引物中还设计了独特的荧光标记物,产物可经由目前普及使用的ABI3730测序仪进行仪器性的图谱判读,避免了人眼识别的经验差异的干扰。
在有经验的实验室内,各组PCR产物也可以直接进行琼脂糖凝胶电泳,经EB染色后,直接在紫外下观察和记录结果,本手册中也描述了这样的流程。
试剂组成(50次量)
PCRPremix* | 500μl×3 |
PrimerMixA(2pmol/μl) | 30μl×2 |
PrimerMixB(2pmol/μl) | 30μl×2 |
PrimerMixC(2pmol/μl) | 30μl×2 |
100μl×1 | |
Negativecontrol(sterilizewater) | 45μl |
*PCRPremix中含有rTaq、反应用Buffer、dNTPMixture等,应尽量避免反复冻融。
保存温度
-20℃保存,应尽量避免反复冻融。
注意事项
本产品用于实验室研究。本检测适用于人鼻咽拭子(鼻腔擦拭液)、鼻咽分泌物和支气管肺泡灌洗液样本。实验过程中应使用一次性耗材,以防污染。PCRPremix中含有rTaq,应尽量避免反复冻融。背景信息
呼吸道感染病原学复杂,包括细菌、病毒、支原体、衣原体、真菌等,其中80%以上是病毒性的[1-4]。该病四季、任何年龄均可发病,通过含有病毒的飞沫、雾滴,或经污染的用具进行传播。常于机体抵抗力降低时,如受寒、劳累、淋雨等情况,原已存在或由外界侵入的病毒或/和细菌,迅速生长繁殖,导致感染,一般5-7天痊愈。常继发支气管炎、肺炎、副鼻窦炎,少数人可并发急性心肌炎、肾炎、风湿热等。呼吸道感染是世界范围内低龄儿童(
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