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实验方法原理 | 荧光A蛋白纯品是在弱碱性条件下,由荧光素通过蛋白上的氨基共价包绕于A蛋白纯品制成。其制备如下。 |
---|---|
实验材料 | A蛋白纯品 |
试剂、试剂盒 | 氧化钠(含NaCl)平衡盐溶液氢氧化钠(含NaCl)FITC |
仪器、耗材 | SephadexG-25柱棕色瓶 |
实验步骤 | 1.取一定量的A蛋白纯品,用内含0.05mol/LNaCl的0.1mol/L氧化钠溶液调节pH值到9.0。 2.于23℃暗处条件下,按1mol的A蛋白中加入2.8mol的FITC,搅拌60min,随时用含0~15mol/L氯化钠的0.1mol/L氢氧化钠使pH值维持在9.0~9.5之间。 3.然后将标记SPA用平衡盐溶液于4℃透析数次,过SephadexG-25柱,除去未标记的FITC,并调节浓度到1mg/ml,装入棕色瓶,并保存于-20℃冰箱中。 |
注意事项 | 展开 |
其他 | 展开 |