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小鼠低氧诱导因子1α(HIF1α)化学发光免疫分析试剂盒
mayitao
/发布时间:1528984185 /浏览量:111
| 货号： | E-CL-M0424c |
| 样本： | 血清，血浆，组织均浆，细胞培养上清等 |
| 适应物种： | Mouse |
| 应用： | 科研实验 |
| 检测方法： | 化学发光 |
| 检测限： | 31.25--2000pg/mL |
| 供应商： | 武汉伊莱瑞特生物科技有限公司 |
| 数量： | 现货 |
该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组HIF-1α浓度。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心CLIA法。用抗小鼠HIF-1α抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的HIF-1α会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠HIF-1α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠HIF-1α抗体与结合在包被抗体上的小鼠HIF-1α结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入发光底物混合液，发光底物在辣根过氧化物酶的催化下发出荧光，用化学发光免疫分析仪测定化学发光值（RLU），HIF-1α浓度与化学发光值之间呈正相关，通过绘制标准曲线求出标本中HIF-1α的浓度。
| 反应类型 | 双抗体夹心CLIA |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 4.5h |
| 反应性 | 小鼠 |
| 检测方法 | Chemiluminescence |
| 检测范围 | 31.25–2000pg/mL |
| 灵敏度 | 18.75pg/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
特异性：可检测天然或部分重组小鼠HIF-1α,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性：板内，板间变异系数均<10%。
典型数据
以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | RLU | Average | CorrectedRLU |
| 2000 | 55465 | 57592 | 57557 |
| 59719 | |||
| 1000 | 24186 | 24377 | 24342 |
| 24568 | |||
| 500 | 11868 | 11794 | 11759 |
| 11720 | |||
| 250 | 5279 | 5578 | 5543 |
| 5877 | |||
| 125 | 2965 | 2854 | 2819 |
| 2743 | |||
| 62.5 | 1368 | 1341 | 1306 |
| 1314 | |||
| 31.25 | 652 | 680 | 645 |
| 708 | |||
| 0 | 34 | 35 | -- |
| 36 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assayPrecision | Inter-assayPrecision | |||||
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| mean(pg/mL) | 94.91 | 242.22 | 701.72 | 100.14 | 223.7 | 707.8 |
| Standarddeviation | 12.31 | 25.77 | 76.84 | 11.16 | 24.96 | 76.87 |
| CV(%) | 12.97 | 10.64 | 10.95 | 11.14 | 11.16 | 10.86 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| SampleType | Range(%) | AverageRecovery(%) |
| Serum(n=5) | 99-114 | 106 |
| EDTAplasma(n=5) | 91-103 | 96 |
| Cellculturemedia(n=5) | 94-109 | 102 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cellculturemedia(n=5) | ||
| 1:2 | Range(%) | 87-101 | 100-115 | 100-114 |
| Average(%) | 93 | 108 | 106 | |
| 1:4 | Range(%) | 87-100 | 97-113 | 95-111 |
| Average(%) | 93 | 103 | 102 | |
| 1:8 | Range(%) | 97-111 | 100-116 | 100-115 |
| Average(%) | 102 | 106 | 106 | |
| 1:16 | Range(%) | 100-114 | 100-118 | 94-108 |
| Average(%) | 108 | 108 | 100 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 名称 | 规格 | 保存条件 |
| CLIA酶标板(可拆卸) MicroCLIAPlate(Dismountable) | 8孔×12条 | -20℃， 可存放6个月 |
| 冻干标准品 ReferenceStandard | 2支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) ConcentratedBiotinylatedDetectionAb(100×) | 1支120μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) ConcentratedHRPConjugate(100×) | 1支120μL | -20℃(避光)， 可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 ReferenceStandard&SampleDiluent | 1瓶20mL | 4℃， 可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 BiotinylatedDetectionAbDiluent | 1瓶14mL | |
| 酶结合物稀释液 HRPConjugateDiluent | 1瓶14mL | |
| 浓缩洗涤液（25×） ConcentratedWashBuffer(25×) | 1瓶30mL | |
| 发光底物A液 SubstrateReagentA | 1瓶5mL | 4℃(避光) |
| 发光底物B液 SubstrateReagentB | 1瓶5mL | 4℃ |
| 封板覆膜 PlateSealer | 5张 | |
| 产品说明书 ProductDescription | 1份 | |
| 质检报告 CertificateofAnalysis | 1份 |
说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
操作步骤
 | 1.Add100μLofstandardorsampletoeachwell.Incubatefor90minat37℃. |
 |  2.Removetheliquid. |
 | 3.Add100μLBiotinylatedDetectionAb.Incubate1hourat37℃.Aspirateandwash3times. |
 | 4.Add100μLHRPConjugate.Incubate30minat37℃.Aspirateandwash5times. |
 | 5.Add100μLSubstrateMixtureSolution.Incubatefor5minat37℃. |
 | 6.Fluorescenceappeared.MeasuretheRLUvaluewiththeChemiluminescenceimmunoassayanalyzer.Calculationoftheresults. |
温馨提示：不可用于临床治疗。
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