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某中药A,体外诱导肿瘤细胞凋亡研究,死亡受体作为主要的凋亡通路,本实验检测到死亡受体通路的FAS,TNF-α,FADD,cleaved-caspase8蛋白的表达都升高,猜想药A可能会通过死亡受体通路诱导细胞凋亡,随后添加caspase8抑制剂,结果却显示细胞死亡率增加,WB结果还未出,理论上应该凋亡受到抑制才对啊?求解!谢谢!!!
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回复:时间:2017-09-17
药物又不可能是单个靶点,你只检测死亡受体通路说明死亡受体通路可能在里面起作用,然而你抑制剂的结果表明你这个死亡受体通路起的作用非常小,所以你应该找其他靶点,死亡受体通路激活只是一个伴随现象
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回复:时间:2017-09-23
展开引用Y丹丹某中药A,体外诱导肿瘤细胞凋亡研究,死亡受体作为主要的凋亡通路,本实验检测到死亡受体通路的FAS,TNF-α,FADD,cleaved-caspase8蛋白的表达都升高,猜想药A可能会通过死亡受体通路诱导细胞凋亡,随后添加caspase8抑制剂,结果却显示细胞死亡率增加,WB结果还未出,理论上应该凋亡受到抑制才对啊?求解!谢谢!!!......请问哪个细胞株是否表达RIPK3?如果实验结果可靠恭喜你药A能引起necroptosis
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回复:时间:2017-09-15
细胞死亡存在细胞凋亡和细胞坏死,细胞凋亡除死亡受体凋亡途径(外源凋亡途径)外,还存在线粒体凋亡途径(内源凋亡途径)以及非经典途径,由EndoG等介导。你的药物处理,检测了死亡受体途径的相关指标,都升高,只能说明,该药物诱导的肿瘤细胞凋亡,存在死亡受体凋亡途径的参与,但这一途径是否是最为核心的凋亡机制,就难以确定了。1、药物处理诱导的细胞凋亡是否同时引起了外源和内源凋亡途径?你使用caspase8的抑制剂,首先,这种抑制剂的效果如何,是否达到了抑制的效果;其次,若caspase8的的确被抑制了,其他凋亡途径如内源凋亡途径的情况如何?是否抑制了外源凋亡途径后,刺激细胞通过内源途径发生凋亡?2、药物诱导是否发生了细胞坏死?你的结果显示,细胞死亡率增加,是细胞凋亡率还是单纯的肉眼观察死细胞漂浮量?3、药物或抑制剂处理的剂量问题。抑制剂(含溶剂)是否对细胞活性本身存在影响?以上仅是个人想法,供参考!
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