核糖核酸酶（胰腺）的测定实验一基本方案
mayitao
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| 实验方法原理 | RNaseⅠ | ||||||||||
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| 实验材料 | 酶样品 试剂、试剂盒 | 乙酸缓冲液乙酸铀酰-高氯溶液RNA（酵母）溶液核酸核酸酶 仪器、耗材 | 分光光度计
实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 0.6ml1％RNA溶液 0.1ml酶（向空白对照中加入约1.0ml0.1mol/L乙酸缓冲液，pH5.0） 37℃培养4min，停止反应要加入0.3ml乙酸铀酰-高氯溶液冰上 防止5min，离心5min，然后稀释0.1ml上清液与0.9mlH2O 测量260nm处增加的吸收值。 计算 1个单位被定义为：在上述的条件下，37℃、pH5.0时，引起吸收值变化1.0的酶量。 注意事项 | 展开 其他 | 试剂： 0.1mol/L乙酸缓冲液，pH5.0（5.7ml乙酸，100％，Mr＝60，溶于800ml水中，用1mol/LNaOH调节至pH4.0，补充至1L） 乙酸铀酰-高氯溶液（0.75％乙酸铀酰溶于25％高氯溶液） RNA（酵母）溶液（50mg/10ml溶于0.1mol/L乙酸钠缓冲液pH5.0）核酸核酸酶（1mg/ml，使用前在0.1mol/L乙酸钠缓冲液pH5.0中稀释100倍）
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