方法：

1、粗酶液的制备

用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010g、0.020g和0.030g，用蒸馏水溶解并定容至100mL，配成浓度分别为0.01%、0.02%和0.03%的粗酶液。

2、实验设计

本实验以10mL色拉油为底物，以酶用量、水解温度、反应时间为因素，通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。

3、酸价的测定

酸价是指中和1mol游离脂肪酸所需NaOH的毫克数，它用于衡量油脂的水解程度。实验中用酸碱滴定法测定水解液的酸价，参照文献[3，4]中所使用的方法，向所得的水解液滴加1mL95%的乙醇溶液，摇匀，终止反应，并加入2滴酚酞指示剂，迅速用0.05mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色，在30s内不消失为终点，记录消耗的NaOH溶液毫升数(V)。用同样的方法测定空白值，每个试验重复两次，以平均值作为测定结果。

酸价按下式计算：X=C(V-V0)×40/M式中:X—油脂酸价(mgNaOH/g油)C—NaOH标准溶液的浓度(mol/L)M—试样的质量(g)40—NaOH的mmol质量(mg/mmol)

4粗脂肪酶活力的测定

在最佳水解条件下，分别测得粗脂肪酶和标准脂肪酶水解液的酸价X1、X2，根据公式U1/U=X1/X2求得粗脂肪酶的活力，其中U1为粗脂肪酶活力，U为标准脂肪酶活力。

5标准脂肪酶液的配制

根据实验最佳条件，配制标准脂肪酶液。一篇相关文献粗脂肪酶活力的测定方法的研究.pdf

答：实验设计，本实验以10mL色拉油为底物，以酶用量、水解温度、反应时间为因素，通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。用色拉油作底物不太妥，一般是用橄榄油，化学纯的。

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