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利用模块装配方法构建锌指 核酸酶以位点特异的方式操作基因组实验一利用模块装配方法构建 ZFN

实验步骤

利用模块装配方法构建ZFN

材料

试剂

琼脂糖凝胶(2.5%)

牛小肠碱性磷酸酯酶

dNTP(每种l〇mm〇l/L)

转化用大肠杆菌

MgCl2(50mmol/L)

质粒:pBluescript(pBS——ZF)和pCDNA6(Invitrogen)

PCR片段纯化试剂盒

10X聚合酶缓冲液

限制性内切核酸酶:Apal、BamHI和SpeI

T7引物

Tag聚合酶

Zif-ZFNDNA模板

仪器

37°C加热块或者水浴

按预期的扩增程序工作的循环变温加热器

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