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S100B蛋白酶联的免疫试剂盒
S100B蛋白酶联的免疫试剂盒
一、S100蛋白简介:S100蛋白被认为是一种脑组织特异性蛋白,它主要分布于神经胶质细胞中,其功能主要涉及细胞内外的钙离子调节。S100包括一系列结构和功能相似的蛋白,其细微结构和存在部位稍有差异。例如:S100β存在于神经胶质细胞和Schwann细胞中,S100a只存在于神经胶质细胞中。目前发现共有16种S100蛋白。S100蛋白还可能存在于恶性黑色素瘤、神经胶质瘤和一些软组织肿瘤中。另外也有少量存在于正常组织中。S100蛋白是广泛分布于不同组织的一类相对分子质量为9000~13000的酸性钙结合蛋白,目前发现该家族至少有19成员,已有13个成员被命名定位,其中S100A1(旧称S100α)和S100B(旧称S100β),S100B主要(96%)存在于脑组织中,所以研究得较多。近年来的动物实验和临床研究发现,脑损伤后,脑脊液和血清中S100B含量升高,升高程度与脑损伤程度以及预后有一定的关系,因而S100B将成为评估脑损伤程度和判断患者预后的新指标。
二、S100蛋白的临床应用:1.脑损伤、中风和脑栓塞:在脑脊液或血清中出现S100蛋白可以认为是中枢神经系统损伤的敏感生化指标。与NSE联用是国际公认的检测脑早期缺血缺氧性损伤和预后的黄金指标。2.恶性黑色素瘤:血清中出现S100蛋白可以认为是各个阶段的亚性黑色素瘤预后不好的独立生化指标。它可以用于恶性黑色素瘤的病程跟踪和疗效观察。3.其它:血清还可以因肾癌、心肌梗塞、肌营养不良、乳腺癌而部分升高。因此,S100蛋白的检测可用于皮肤科、神经内科、神经外科和肿瘤科。
三、S100B蛋白双抗体夹心ELISA简介:采用抗S100B蛋白单克隆抗体为包被抗体,抗S100多克隆抗体为检测抗体,对正常人和神经系统病变患者血清中S100B蛋白进行了检测。该法线性范围广,灵敏度高,重复性好。血清参考范围(0.068~0.728)ug/L。142份临床血清标本总阳性率为脑梗塞21.6%、脑挫裂伤33.3%、脑出血5.9%。该法对临床脑及相关疾病的诊断及预后判断有很好的应用前景。为临床提供快速、可信的定量指标。
四、S100B蛋白ELISA试剂盒(96T)特点: 双抗体定量夹心法 灵敏度0.02ug/L 线性范围0.02-5ug/L 批内和批间Cv均<8%</8>标本: 血清 脑脊液 脐带血 尿液适用于颅脑外伤、脑挫伤、脑梗死、脑出血、蛛网膜下腔出血、神经胶质瘤及急性脊髓炎等疾病的诊断和预后判断。
(一)、试剂组成:1、稀释液Ⅰ:用于稀释标准品或待测样品。2、稀释液Ⅱ:用于稀释抗体。3、S100B标准品:0.1ug/ml1支(用稀释1倍比稀释)4、第二抗体:25ul/支(用稀释液Ⅱ10ml稀释)5、酶标抗体:5ul/支(用稀释液Ⅱ10ml稀释)6、显色液:底物缓冲液5ml+底物液5ml(临用前配制)。7、终止液8、洗涤液:10倍浓缩(二)、操作步骤:1、0.1ug/mlIS100B标准品100ul,加稀释液I1.0ml,而后倍比稀释10管(10--0.195ug/L),100ul/孔:血清或脑脊液标本100ul/孔,37℃1h,洗板5次。2、第二抗体100ul/孔,37℃1h,洗板5次。3、酶标抗体100ul/孔,37℃1h,洗板5次。4、显色剂100ul/孔,37℃10min,终止液50ul/孔,以稀释液I作空白对照,在450(A)波长读取吸光度。以A450平均值为纵座标,S100B蛋白浓度的对数值为横座标,计算S100B蛋白的含量。(三)、注意事项:1、试剂盒置4℃保存。2、用移液器定量取样,移液吸头不可交叉使用。3、第二抗体及酶标抗体在临用前稀释。4、显色液务必在临用前(洗板后)避光配制。5、试剂盒效期暂为90天。
五、临床应用单位:测定人S100B的双抗体夹心ELISA法,在首都医科大学安定医院科研室、第一军医大学珠江医院检验科、河北邯郸中心医院检验科、第三军医大学心血管外科、哈尔滨医科大学附属第一医院神经内科、福建医科大学附属第一医院神经内科、福建医科大学附属医院麻醉科、陕西省人民医院儿科等单位应用,进一步证实S100B蛋白对脑损伤及脑血管疾病具有早期诊断及预后判断的价值。
临床应用、操作步骤
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