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2x HotsTaq qPCR Master MixⅠ(探针法）02164804724

mayitao /发布时间:1530108926 /浏览量:185

货号：	HTM-200
数量：	大量

【前言】

本产品提供了进行简便、灵敏和无污染的PCR检测的完整系统。HotsTaqqPCRMasterMixⅠ包含了经过优化的缓冲液、dNTP、HotsTaqCG热启动酶和MgCl₂溶液混合物，使用者只需加入适量的引物、探针和待检样品，即可进行RealTimePCR检测。

本产品使用化学修饰的HotsTaqCG热启动酶，为PCR反应提供了更高的产量及灵敏度、特异性。能够检测低至10个拷贝的目的基因，并最终产生高达7个数量级的动态范围结果。

【规格】

200Reactions

【试剂盒组成】

2xHotsTaqqPCRMasterMixⅠ4×1.25ml

【用户自备的试剂、器材】

1．引物、探针

试验前应准备好用于检测目的基因的引物、探针。引物、探针应用HPLC或PAGE纯化。

2．实验用水

使用PCR用纯水。

3．待检样品

cDNA或基因组DNA

4.参照染料ROX

5.RNasefree&DNasefree的tip头，离心管,薄壁PCR管等

6.各种规格的移液器

7.RealtimePCR仪

本产品适用于下列RealtimePCR仪：ABIPRISM^®7700、ABIPRISM^®7500、ABIPRISM^®7300、ABIPRISM^®7000、MJOpticon、BIORADiCycler、BioFlux公司的LineGene等的RealtimePCR仪。具体使用方法请参照相应仪器的说明书。

【反应液配制】

反应液组份	加量(μl)	终浓度	备注
2xHotsTaqqPCRMasterMixⅠ	25	1×
上游引物	5	200~800nM	用户提供
下游引物	5	200~800nM	用户提供
探针	5	100~200nM	用户提供
待检样品	5	1~10ng	用户提供
无菌去离子水	5	-	用户提供
总体积	50	-

注：通常初次使用本试剂时，可用引物浓度300nM，探针浓度150nM进行实验，根据实验结果具体情况，在200～800nM范围内调整引物浓度，在100～200nM范围内调整探针浓度以达到最佳检测效果。

【扩增条件】

当引物Tm在60℃以上，建议使用：

95℃5分钟→95℃30秒→60℃1分钟

40个循环

当引物Tm在60℃以下，建议使用：

95℃5分钟→95℃30秒→55℃45秒→72℃1分钟

40个循环

注：以上扩增条件为实例，用户应根据引物的Tm值及扩增片段的大小来确定适合的变性时间、退火温度，退火时间和循环次数，黑体字部分必须保留。

【保存条件】

本产品在-20℃以下冷冻保存，避免反复冻融。

温馨提示：不可用于临床治疗。

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