蛋白交联剂

2021-08-15【求助】用了交联剂之后为什么蛋白不见了?

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大家好
我现在做关于细胞膜分子交联,然后用western检测多聚体的实验
遇到很大的困难
刚开始用真核细胞做,就发现细胞交联后提取蛋白,比未交联的细胞蛋白总量减少
后来用原核先提取蛋白做实验
发现交联终止后,做western交联的孔曝光没有条带,后来用同样的方法重新做了一次PAGE,染胶,发现蛋白不见了
为什么交联后蛋白减少或是不见了呢
我用的都是Pierce公司的交联剂,用过EGS和BOSCOES,都有同样的问题
方法是综合说明书和一片文献上来的
到底问题出在哪里呢
请各位大侠帮帮忙
实验卡在这里进行不下去了
我快急死了
请有经验的,用过交联剂的老师,同学多多指导
万分感谢!!
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相关回复

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回复:时间:2021-08-23

怎么没人回到我呀请各位帮帮忙呀难道真的没人用交联剂吗

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回复:时间:2021-08-24

我用的交联剂是DSS,也有这个问题,交联剂貌似会使蛋白降解

已帮助 0

回复:时间:2021-08-21

你这个问题现在有解决么?我想换用其他交联剂试一下