miRNA生物传感器

本信息数据库包括以下信息：
细胞miRNA活性谱（CellularmiRNAActivityProfile）
各种细胞的miRNA特征性指纹库（CellularmiRNAFinger-Print），可做为细胞的“身份证”
本数据库为逐渐增加内容的、开放性的。 发表的相关文章见：http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0029551

产品中文名称：miRNA生物传感器阵列

产品英文名称：miRNAA-SensorArray 

需要本批号产品的可以联系公司订货。
电子邮件和电话均可以。
如需要特殊的阵列，本公司也可以提供订制服务。
如需要本公司代为检测细胞的miRNA活性指标，可以将细胞提供给我们，本公司也可以提供检测服务。

特殊阵列组合的miRNAAsensor产品
产品组成：
1、nomiRT：含20份次实验用量； 
2、具体的miR品种，如miR-15a或者其它品种：含20份次实验用量/品种；
3、Fluc检测试剂盒（备选）；
4、Gluc检测试剂盒（备选）。

相关技术背景
microRNA（简称miRNA）是一种细胞内源性的小ncRNA（Non-codingRNA，非编码RNA），miRNA网络被发现是基因表达调控的重要层次，除了参与生长、发育、分化、凋亡等重要生物学过程，还与疾病的发生、发展、转归关系密切。

本项技术和产品的工作原理
使用病毒载体携带的miRNA的传感器，制备出包括了全部miRNA传感器种类的病毒载体，并将其包被在细胞培养孔板上，采用病毒反向感染法使包被在孔板上的病毒载体反向感染后加入的细胞，以用于miRNA传感器检测细胞的miRNA活性。
由于使用可分泌表达的、可受细胞内miRNA活性调节的报告基因Gluc做为指示待检测指标的生物传感器，因此，可以通过检测细胞培养上清中的Gluc表达水平来体现细胞内miRNA的适时的活性，并可多次反复取上清进行检测。
Gluc的工作原理
Gaussia荧光素酶(Gluc,Gaussialuciferase)，其酶促反应底物为：腔肠素(coelenterazine)

发光反应：
在Gluc催化下，发生下述反应并产生荧光：
Coelenterazine+O2→coelenteramide+CO2
Fluc的工作原理
萤火虫荧光素酶
（Fluc，fireflyluciferase），
其酶促反应底物为：D-luciferin
发光反应：
在Fluc催化下，发生下述反应并产生荧光：
luciferin+ATP→luciferyladenylate+PPi
luciferyladenylate+O2→oxyluciferin+AMP+light

本产品的应用范围
1、细胞miRNA活性谱的检测，产生细胞指纹，建立细胞特征信息库；
2、miRNA将成为疾病筛查、诊断、疗效评价和预后判断上一种新的标志物；
3、用于肿瘤检测和治疗评价、机理研究；
4、用于新药研发过程中的大量的药物筛选工作，药敏、药靶研究开发；
5、用于开发可做为新的治疗基因的miRNA；
6、用于基因表达调控等基础研究；
7、用于免疫检测；
8、病毒学研究。

本产品的特点
本产品可实时、连续、动态检测活细胞内miRNA活性谱的变化。
该产品检测的是活细胞的miRNA活性而不是miRNA的拷贝数，这与其它方法不同。
本方法具有方法特异、敏感、使用过程简便、采购成本和使用成本均低廉、费用便宜、全自动获取大量或海量数据结果、通用性强、成功率高、结果可信等特点。
可用于药物筛选、及其它干预因素对miRNA活性的影响研究。
该产品为miRNA活性检测方法带来了技术突破，将极大地促进相关行业的发展，将为医药、卫生事业带来革命性进展。
通过产品的生产制备流程质量控制，该产品质量稳定、品质均一性好，检测结果可重复性好。

实施例：摘录于http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0029551

 实验流程及步骤
1、将等量单细胞悬液按10(e)4-5个细胞/孔加入到miRNAA-Sensor板（96孔细胞培养板）中，置于CO2培养箱培养；
2、用96孔荧光检测仪测细胞上清的荧光强度，获得原始数据。
miRNA活性单位为RIF（RelativeInhibitedFold，相对抑制倍数）。

组织块的miRNA活性检测：手术、活检取样获得的无污染的、有活性的组织块，经消化、处理成单细胞悬液，进行原代细胞培养，达到上述步骤1中所描述的细胞数量，即可按上述步骤进行miRNA活性检测。

实验的硬件条件
1、可进行动物细胞培养的实验室，主要包括：超净工作台、CO2培养箱；
2、96孔荧光检测仪：miRNA活性检测结果为全自动、机检格式、定量数据。
以上为使用本产品所需基本条件。
3、如需大量药物筛查测细胞的miRNA活性变化，则可使用叠板系统与96通道自动移液工作站组成全自动工作站，进行细胞的加样、加药物、吸取上清等操作。

产品包装形式：试剂盒
包括：miRNAA-Sensor板、荧光素酶检测试剂（备选）2部分
本产品为包被在96孔细胞培养板的生物传感器，该板为无菌、独立包装，方便使用。

保质期
miRNAA-Sensor板可置于4℃保存2年。室温下可保存1周。可常温下运输。

产品使用说明书
下载PDF文本，请订购产品或签订服务合同后email至sale@five-plus.com.cn提请下载产品使用说明书文件。

本产品的应用和结果示例
应用本技术和miRNAA-Sensor板检测试剂盒，对下列细胞进行过miRNA活性的系统研究：
HEK293、HEK293T、HEK293FT、BHK-21、Vero、CHO、Hela、huH7、A549、QGY-7703、HL-7702、HepG2、U937、C2C12、cos7、PA317、LLC-MK2、HGC1、SP2/0、B16、HL-60、WISH、MDCK、K562等。

原始数据和处理后数据为Excel形式，此处未展示。只展示了图形形式的结果，比较直观。

miRNAA-Sensor的订制服务
本产品可以根据客户的具体要求，订制miRNAA-SensorArray孔板：客户在本网站上自主选定所需要的miRNA种类和孔板的数量，提交给我公司，公司根据客户的要求，包被所需要数量的孔板。
根据客户的具体要求订制miRNAA-SensorArray孔板的交货周期为2个月，也可以办理加急服务。

细胞miRNA活性的检测服务
如果客户目前缺乏现成的实验条件，如不能进行细胞培养和/或不能进行96孔荧光检测仪的检测等，我公司也可进一步提供细胞培养和细胞miRNA活性的检测服务。此服务的完成周期为在孔板的交货周期2个月的基础上增加1周时间。

数据结果
完成工作后，公司将提供相关的原始数据和运算后数据、图表、仪器名称型号、试剂名称、使用方法等文章发表所需要的信息。
公司将在专门的数据库网站（www.miRNA.org.cn）中提供大量的相关的细胞miRNA活性谱的基础性数据。

可选择包被的miRNA的种类
请填入需订制的孔板的数量，选定所需的miRNA的种类，并在本页面的最后部分点击确认订制，以便获得新生成的“订制单”文件，同时，请将该“订制单”文件以附件形式发送到我公司邮箱：sale@five-plus.com.cn
带*符号的miRNA序号为有活性形式的一条链。