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2021-07-20Sh RNA干扰后，mRNA水平干扰不明显，蛋白水平明显，如何解释？相关文献？

butterflybow
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找公司设计了重组慢病毒载体，共设计3条干扰序列，转染靶细胞测干扰效率。发现mRNA表达水平下降不明显，而蛋白水平明显下降。请问该如何解释，有相关文献吗？可以用抑制了靶蛋白翻译来解释吗？


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已帮助 0人

回复：时间：2021-07-20

How is the level of Cbl-b mRNA determined?

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回复：时间：2021-07-21

实时定量荧光PCR

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回复：时间：2021-07-29

ItwouldbebetterthatasingleWesternblotbeusedandshowboth115kDatargetproteinAND37kDaloADIngcontrolinordertounderstandtheshRNAexperimentresultstruly.TheshRNAlentivirusinfectionmaybetoxictoproteinsynthesisininfectedcells,specificallybyshRNA2and3,whiletargetmRNAknockdownbyshRNA1showseffective,butRNAtranscriptionisnotinhibitedaround72hourspostinfectionTheinhibitionofproteinsynthesisbylentiviralvectorinfectioncouldberecoveredinshRNA1andinshRNA2,butnotinshRNA3ninetysixhourspostinfection,atthistimepointitrevealsstrongtargetmRNAknockdownbyshRNA1,moderatedinhibitionbyshRNA2,lesseffectiveinhibitionbyshRNA3.AsuggestionthatacombinedlentivirusinfectionwiththoseproducingshRNA1,andshRNA3andshRNA2bedonetofindbestshRNAcombinationshowingeffectivetargetmRNAknockdownwhileposingnoharmtocellularproteinsynthesis.

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