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各位大神们:
本人在做ELISA(双抗体夹心)实验时,同一实验重复,4次,同样的条件,同样的试剂,只是每次实验的天数不一样,隔一天做一次。包被抗体(0.25ug/ml)、检测抗体(1ug/ml)和抗原(最高浓度为10ng/ml)的浓度都没有变,但检测结果却从1.4降到了0.8,又降到0.4,最后降到0.17(抗原最高浓度对应的OD值)。实在分析不出是什么原因,难道是抗原抗体保存的问题吗?
抗原抗体分装后一直保存在-20,用的时候才拿出来,用完放4度,没有反复冻融。但捕获抗体的最初浓度是86ug/ml,会不会是保存浓度太低?
请各位大神指教呀~
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