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各位大神们：
本人在做ELISA（双抗体夹心）实验时，同一实验重复,4次，同样的条件，同样的试剂，只是每次实验的天数不一样，隔一天做一次。包被抗体（0.25ug/ml）、检测抗体(1ug/ml)和抗原(最高浓度为10ng/ml)的浓度都没有变，但检测结果却从1.4降到了0.8，又降到0.4，最后降到0.17（抗原最高浓度对应的OD值）。实在分析不出是什么原因，难道是抗原抗体保存的问题吗？
抗原抗体分装后一直保存在-20，用的时候才拿出来，用完放4度，没有反复冻融。但捕获抗体的最初浓度是86ug/ml，会不会是保存浓度太低？
请各位大神指教呀~
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