提供商：	卓立生物
服务名称：	数字PCR技术服务

数字PCR技术服务
技术原理：
数字PCR(也可称单分子PCR)包括两部分内容：PCR扩增和荧光信号分析。在PCR扩增阶段，与传统技术不同，数字PCR需要将样品稀释到单分子水平，并平均分配到几十至几万个单元中进行反应。不同于qPCR对每个循环进行实时荧光测定的方法，数字PCR技术是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集。最后通过直接计数或泊松分布公式计算得到样品的原始浓度或含量。数字PCR的定量方法不依赖于扩增曲线的循环阈值，因此不受扩增效率的影响，也不必采用看家基因和标准曲线，具有很好的准确度和重现性，可以实现绝对定量分析。在未来十年内，医学保健的目标是提供优质高效的个性化医疗。PCR方法会在实现这个目标的过程中发挥重要作用。相比于传统的PCR，数字PCR技术有着无可比拟的优势和广泛的应用前景。
 
         
             
应用领域：
 

• 突变/稀有变异检测（Mutation/Rarevariantdetection）
• 拷贝数变异（Copy-numbervariation）
• 进入外周循环（包括血液和粪便）的肿瘤组织核酸分析
• 无创产前筛查：
• 转化移植检测。
• 药理学（Pharmacogenetics）
• 基因表达分析（Geneexpressionanalysis）-特别针对单细胞或少量细胞或者血清血浆样品
• 线粒体拷贝数分析与线粒体突变分析
• 数字PCR可以验证二代测序(NGS)

 
应用案例：
 
 

• HuggettJF,FoyCA,BenesVetal.(2013)ThedigitalMIQEguidelines:minimuminformationforpublicationofquantitativedigitalPCRexperiments.ClinicalChem6:892–902.

 
 

• AbsolutequantificationbydropletdigitalPCRversusanalogreal-timePCRChristopherMHindsonetal.naturemethods|VOL.10NO.10|OCTOBER2013

 
 

• DetectionofCancerDNAinPlasmaofEarlyStageBreastCancerPatientsJuliaA.Beaver*1,DanijelaJelovacFebruary19,2014AmericanAssociationforCancerResearch

 
 

• EvaluationofaDropletDigitalPolymeraseChainReactionFormatforDNACopyNumberQuantificationLeonardoB.Pinheiro,VictoriaA.Coleman,November28,2011AmericanChemical

 
 

• QinJ,JonesRC,RamakrishnanR.Studyingcopynumbervariationsusingananofluidicplatform.NucleicAcidsRes,2008,36(18):e116

 
 

• LoYMD,FionaMF,ChanKCA,etal.DigitalPCRforthemoleculardetectionoffetalchromosomalaneuploidy.ProcNatlAcadSciUSA,2007,104(32):13116-13121

 
 

• WarrenL,DavidB,IrvingLW,etal.TranscriptionfactorprofilinginindividualhematopoieticProgenitorsbydigitalRT-PCR.ProcNatlAcadSciUSA,2006,103(47):17807-17812

 
 

• OttesenEA,JongWH,StephenRQ,etal.MicrofluidicdigitalPCRenablesmultigeneanalysisofindividualenvironmentalbacteria.Science,2006,314(5804):1464-1467

 
 

• TadmorAD,ElizabethAO,JaredRL,etal.ProbingindividualenvironmentalbacteriaforvirusesbyusingmicrofluidicdigitalPCR.Science,2011,333(6038):58-62

 
 

• TianWang,HongyingSha.,etal.PolarBodyGenomeTransferforPreventingtheTransmissionofInheritedMitochondrialDiseases。Cell157,1591–1604,June19,2014