现在向您隆重介绍一种可处理最难转染细胞的通用型试剂。可凭借一种具有以下特性的试剂盒，解放那些您真正关心的生物相关细胞类型：

• 卓越的性能——最高的效率，适用于各种难以转染的以及常见的细胞类型
• 更高的细胞活性——对细胞作用温和，毒性低
• 功能多样——适用于DNA、RNA和共转染
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在难转染细胞类型中具有广泛的优良性能

Lipofectamine®3000试剂充分利用了我们先进的脂质体纳米颗粒技术，实现了超高转染性能和可重复的试验结果。其可在最广泛的难转染和通用细胞类型（图1）中获得非凡的转染效率，同时提升细胞存活率。



图1.Lipofectamine®3000试剂胜过了Lipofectamine®2000和FuGENE®HD试剂。每一种试剂均用于以96孔形式转染EK293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549细胞系，并在转染后48小时分析GFP表达情况。在所有五种细胞系中，Lipofectamine®3000都表现出了高于Lipofectamine®2000和FuGENE®HD的GFP转染效率。

图2.蛋白印迹分析显示了HepG2细胞系中GST-STAT蛋白的表达。使用Lipofectamine®2000试剂、Lipofectamine®3000试剂、FuGENE®HD试剂（竞争产品1）和X-tremeGENE®HP试剂（竞争产品2）将GST-STAT质粒，在24孔板内转染入细胞。在转染后48小时，收集细胞并进行蛋白印迹分析。β-肌动蛋白转膜图代表四种样品上样量相等。

更高细胞活性，更低细胞毒性

在开发Lipofectamine®3000时，我们对转染过程的四个步骤进行了优化，同时结合了我们先进的脂质体纳米颗粒技术。其所具有的超高转染效率使得我们可以减少试剂剂量，降低处理细胞时的潜在毒性风险。

图3.采用指定剂量的每种试剂，通过绿色荧光蛋白(GFP)表达载体，以96孔形式转染HeLa细胞。在转染后48小时，采用流式细胞仪进行分析，以测定百分比形式的转染效率以及GFP表达强度。相对于Lipofectamine®2000试剂和Lipofectamine®LTX试剂，Lipofectamine®3000试剂表现出了更高的转染效率和蛋白表达水平。

表1.在一系列细胞系的测试中，Lipofectamine®3000试剂获得了超过Lipofectamine®2000试剂的转染效率。

• 细胞系#-C
• 细胞系D-J
• 细胞系K-P
• 细胞系R-Z

细胞类型	Lipofectamine®3000试剂转染效率	Lipofectamine®3000相对于Lipofectamine®2000试剂蛋白表达水平提高倍数
3T3		4
4T1		2
A431		2
A549		3
ACHN		2
bEnd.3		9
BJ		3
BT-549		4
C2C12		3
C6		5
Caco-2		2
Caki-1		4
CHO-K1		1
CHO-S		1
COLO205		4
COS-7		4

转染效率(%):<30%    30-50%   51-79%   >80% 

增强您的癌症研究工作

使用最具生物相关性的细胞系，可为您的研究课题提供最具相关性的答案。Lipofectamine®3000试剂适用于最广泛的细胞谱系且兼具较高的转染效率，使您可以非常灵活地在研究中应用自己选择的细胞。在一系列提取自不同组织的癌症细胞中，Lipofectamine®3000表现出了明显高于Lipofectamine®2000试剂等顶级转染试剂的转染性能。采用Lipofectamine®2000试剂时，仅有25%的选定癌症细胞系属于易转染（转染效率超过50%）的细胞系，而采用Lipofectamine®3000试剂时，则有60%的细胞系属于易转染细胞系。

表2.在癌症细胞系中，Lipofectamine®3000试剂获得了超过Lipofectamine®2000试剂的转染效率。

癌症细胞系	Lipofectamine®3000试剂转染效率	Lipofectamine®3000相对于Lipofectamine®2000试剂蛋白表达水平提高倍数
Hs578.T		3
SW480		2
SK-MEL-28		2
4T1		2
RD		4
Saos-2		4
PANC-1		3
NCI-H23		2
BT-549		4
L6		8
SK-OV-3		3
DU145		2
HCC1937		5
SW620		5
MDA-MB-468		9
NCI-H460		17
Caki-1		4

转染效率(%):<30%    30–50%   51–79%   >80%

图4.用Lipofectamine®2000试剂和Lipofectamine®3000试剂将GFP表达质粒转染进17种细胞系中，采用24孔形式（以0.5µg质粒/孔的规格）和各试剂推荐的试验方案。在转染后48小时，分析GFP表达。每种条件均进行三次重复测试，图中的数据点为平均转染效率+标准偏差。

改善基因组编辑结果

开发Lipofectamine®3000试剂，旨在突破输送技术的界限，促进生物相关系统内的新技术发展，例如基因组编辑。通过这一新试剂，GeneArt®TAL和CRISPR可以靶向HepG2和U2OS细胞内的AAVS1位点，同时表现出更佳的转染效率、平均荧光强度和基因组切割效果。这些改进之处有助于最大限度减少繁重的下游工作，更便于进行干细胞处理，增强转基因在细胞基因组中的位点特异性插入。

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图5.GeneArt®TAL和CRISPR的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A)U2OS和(B)HepG2细胞系中的AAVS1位点。采用GeneArt®基因组切割检测试剂盒分析切割效率。



图6.使用CRISPR载体时的转染效率和蛋白表达。该载体含有OFP报告基因，并采用Lipofectamine®2000或Lipofectamine®3000转染试剂转染到(A)U2OS和(B)HepG2细胞系中。柱状图所示为报告基因的表达。图片所示为相应细胞表达OFP的荧光图。