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“Knockout First”“一鼠多用”基因敲除服务
提供商: | 仁源生物技术(上海)有限公司 |
服务名称: | “Knock-outFirst”“一鼠多用”基因敲除服务 |
具体策略如下:
首先,采用CGES技术,将“FRT-SA-EGFP-LoxP-NEO-FRT-LoxP”元件,以及第3个“LoxP”元件,分别插入到一个内含子与下游的内含子中去。当获得基因打靶成功的小鼠后,
(i)若直接与Cre小鼠交配,可以去除第1与第3个LoxP位点间的序列,从而获得Reporter小鼠(目标基因会同时失活),即目标基因在何种组织与细胞中表达,细胞就会被EGFP荧光蛋白所标记(也可以根据一个需要替换成其它颜色荧光蛋白);
(ii)若直接与全身性的Flp小鼠(如Actin-Flp小鼠)交配,可以去除第1与第2个Frt位点间的序列(包含第1个LoxP位点),从而获得条件型Flox小鼠;
(iii)如果再将Flox小鼠与组织特异性的Cre小鼠交配,即可获得组织特异性的基因敲除小鼠。
“Knock-outFirst”服务流程和周期:(9-12个月)
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