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内切酶的热失活参数

蚂蚁淘 /发布时间:1545759794 /浏览量:349

热失活是终止酶切反应的一种简便易行的方法。大多数最适反应温度是37℃的酶在65℃下温育20分钟即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如将温度升高至80℃，温育20分钟也可失活。下表注明了每种酶的失活条件。

在50μl的反应体系中，37℃条件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作为底物，加入5-10μl内切酶及相应缓冲液，反应60分钟，然后升温至65℃或80℃温育20分钟进行热失活。在上述混合液中加入0.5μg底物DNA（通常为λDNA），调节温度至最适反应温度，温育60分钟。若琼脂糖电泳显示底物部分或完全被消化，则表明该酶没有完全被热失活。

Enzyme	HeatInactivation(temperature)
AATII	Yes(65°C)
AccI	Yes(80°C)
Acc65I	Yes(65°C)
AciI	Yes(65°C)
AclI	No
AcuI	Yes(65°C)
AfeI	Yes(65°C)
AflII	Yes(65°C)
AflIII	Yes(80°C)
AgeI	Yes(65°C)
AhdI	Yes(65°C)
AleI	Yes(65°C)
AluI	Yes(65°C)
AlwI	Yes(65°C)
AlwNI	Yes(65°C)
ApaI	Yes(65°C)
ApaLI	No
ApeKI	No
ApoI	Yes(80°C)
AscI	Yes(65°C)
AseI	Yes(65°C)
AsiSI	Yes(80°C)
AvaI	Yes(80°C)
AvaII	Yes(65°C)
AvrII	No
BaeI	Yes(65°C)
BamHI	No
BanI	Yes(65°C)
BanII	Yes(65°C)
BbsI	Yes(65°C)
BbvI	Yes(65°C)
BbvCI	Yes(80°C)
BccI	Yes(65°C)
BceAI	Yes(65°C)
BcgI	Yes(65°C)
BciVI	Yes(65°C)
BclI	No
BfaI	Yes(80°C)
BfrBI	Yes(80°C)
BfuAI	Yes(65°C)
BfuCI	Yes(80°C)
BglI	Yes(65°C)
BglII	No
BlpI	No
Bme1580I	Yes(80°C)
BmgBI	Yes(65°C)
BmrI	Yes(65°C)
BmtI	Yes(65°C)
BpmI	Yes(65°C)
Bpu10I	Yes(80°C)
BpuEI	Yes(65°C)
BsaI	Yes(65°C)
BsaAI	Yes(80°C)
BsaBI	Yes(80°C)
BsaHI	Yes(80°C)
BsaJI	Yes(80°C)
BsaWI	Yes(80°C)
BsaXI	No
BseRI	Yes(65°C)
BseYI	Yes(65°C)
BsgI	Yes(65°C)
BsiEI	Yes(80°C)
BsiHKAI	Yes(80°C)
BsiWI	Yes(80°C)
BslI	Yes(80°C)
BsmI	Yes(80°C)
BsmAI	Yes(80°C)
BsmBI	Yes(80°C)
BsmFI	Yes(80°C)
BsoBI	No
Bsp1286I	Yes(65°C)
BspCNI	Yes(80°C)
BspDI	Yes(65°C)
BspEI	Yes(80°C)
BspHI	Yes(65°C)
BspMI	Yes(65°C)
BsrI	Yes(80°C)
BsrBI	Yes(80°C)
BsrDI	Yes(80°C)
BsrFI	No
BsrGI	Yes(80°C)
BssHII	Yes(80°C)
BssKI	Yes(80°C)
BssSI	Yes(80°C)
BstAPI	Yes(80°C)
BstBI	No
BstEII	No
BstF5I	No
BstNI	No
BstUI	No
BstXI	Yes(65°C)
BstYI	Yes(80°C)
BstZ17I	No
Bsu36I	Yes(80°C)
BtgI	Yes(80°C)
BtgZI	Yes(80°C)
BtsI	Yes(80°C)
Cac8I	Yes(65°C)
ClaI	Yes(65°C)
CviAII	Yes(65°C)
DdeI	Yes(65°C)
DpnI	Yes(80°C)
DpnII	Yes(65°C)
DraI	Yes(65°C)
DraIII	Yes(65°C)
DrdI	Yes(65°C)
EaeI	Yes(65°C)
EagI	Yes(65°C)
EarI	Yes(65°C)
EciI	Yes(65°C)
EcoNI	Yes(65°C)
EcoO109I	Yes(65°C)
EcoRI	Yes(65°C)
EcoRV	Yes(80°C)
FatI	Yes(65°C)
FauI	Yes(65°C)
Fnu4HI	Yes(65°C)
FokI	Yes(65°C)
FseI	Yes(65°C)
FspI	Yes(65°C)
HaeII	Yes(80°C)
HaeIII	Yes(80°C)
HgaI	Yes(65°C)
HhaI	Yes(65°C)
HinP1I	Yes(65°C)
HincII	Yes(65°C)
HindIII	Yes(65°C)
HinfI	Yes(80°C)
HpaI	No
HpaII	Yes(65°C)
HphI	Yes(65°C)
Hpy99I	Yes(65°C)
Hpy188I	Yes(65°C)
Hpy188III	Yes(65°C)
HpyCH4III	Yes(80°C)
HpyCH4IV	Yes(65°C)
HpyCH4V	Yes(65°C)
I-CeuI	Yes(65°C)
I-SceI	Yes(65°C)
KasI	Yes(65°C)
KpnI	No
MboI	Yes(65°C)
MboII	Yes(65°C)
McrBC	Yes(65°C)
MfeI	Yes(65°C)
MluI	Yes(65°C)
MlyI	Yes(65°C)
MmeI	Yes(80°C)
MnlI	Yes(65°C)
MscI	Yes(65°C)
MseI	Yes(65°C)
MslI	Yes(65°C)
MspI	Yes(65°C)
MspA1I	Yes(65°C)
MwoI	No
NaeI	Yes(65°C)
N.AlwI	Yes(80°C)
NarI	Yes(65°C)
N.BbvCIA	Yes(80°C)
N.BbvCIB	Yes(80°C)
N.BstNBI	Yes(80°C)
NciI	No
NcoI	Yes(65°C)
NdeI	Yes(65°C)
NgoMIV	Yes(80°C)
NheI	Yes(65°C)
NlaIII	Yes(65°C)
NlaIV	Yes(65°C)
NotI	Yes(65°C)
NruI	Yes(65°C)
NsiI	Yes(65°C)
NspI	Yes(65°C)
PacI	Yes(65°C)
PaeR7I	No
PciI	Yes(65°C)
PflFI	Yes(65°C)
PflMI	Yes(65°C)
PhoI	No
PI-PspI	No
Pl-SceI	Yes(65°C)
PleI	Yes(65°C)
PmeI	Yes(65°C)
PmlI	Yes(65°C)
PpuMI	No
PshAI	Yes(65°C)
PsiI	Yes(65°C)
PspGI	No
PspOMI	Yes(65°C)
PstI	Yes(80°C)
PvuI	Yes(80°C)
PvuII	No
RsaI	Yes(65°C)
RsrII	Yes(65°C)
SacI	Yes(65°C)
SacII	Yes(65°C)
SalI	Yes(65°C)
SapI	Yes(65°C)
Sau96I	Yes(80°C)
Sau3AI	Yes(65°C)
SbfI	Yes(65°C)
ScaI	Yes(80°C)
ScrFI	Yes(65°C)
SexAI	Yes(65°C)
SfaNI	Yes(65°C)
SfcI	Yes(65°C)
SfiI	No
SfoI	Yes(65°C)
SgrAI	Yes(65°C)
SmaI	Yes(65°C)
SmlI	No
SnaBI	Yes(80°C)
SpeI	Yes(65°C)
SphI	Yes(65°C)
SspI	Yes(65°C)
StuI	Yes(65°C)
StyI	Yes(65°C)
StyD4I	Yes(65°C)
SwaI	Yes(65°C)
TaqI	Yes(80°C)
TfiI	No
TliI	No
TseI	No
Tsp45I	No
Tsp509I	No
TspRI	No
Tth111I	No
XbaI	Yes(65°C)
XcmI	Yes(65°C)
XhoI	Yes(65°C)
XmaI	Yes(65°C)
XmnI	Yes(65°C)
ZraI	Yes(80°C)

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