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内切酶的热失活参数
蚂蚁淘
/发布时间:1545759794 /浏览量:368
热失活是终止酶切反应的一种简便易行的方法。大多数最适反应温度是37℃的酶在65℃下温育20分钟即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如将温度升高至80℃，温育20分钟也可失活。下表注明了每种酶的失活条件。
在50μl的反应体系中，37℃条件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作为底物，加入5-10μl内切酶及相应缓冲液，反应60分钟，然后升温至65℃或80℃温育20分钟进行热失活。在上述混合液中加入0.5μg底物DNA（通常为λDNA），调节温度至最适反应温度，温育60分钟。若琼脂糖电泳显示底物部分或完全被消化，则表明该酶没有完全被热失活。
| Enzyme | HeatInactivation(temperature) |
| AATII | Yes(65°C) |
| AccI | Yes(80°C) |
| Acc65I | Yes(65°C) |
| AciI | Yes(65°C) |
| AclI | No |
| AcuI | Yes(65°C) |
| AfeI | Yes(65°C) |
| AflII | Yes(65°C) |
| AflIII | Yes(80°C) |
| AgeI | Yes(65°C) |
| AhdI | Yes(65°C) |
| AleI | Yes(65°C) |
| AluI | Yes(65°C) |
| AlwI | Yes(65°C) |
| AlwNI | Yes(65°C) |
| ApaI | Yes(65°C) |
| ApaLI | No |
| ApeKI | No |
| ApoI | Yes(80°C) |
| AscI | Yes(65°C) |
| AseI | Yes(65°C) |
| AsiSI | Yes(80°C) |
| AvaI | Yes(80°C) |
| AvaII | Yes(65°C) |
| AvrII | No |
| BaeI | Yes(65°C) |
| BamHI | No |
| BanI | Yes(65°C) |
| BanII | Yes(65°C) |
| BbsI | Yes(65°C) |
| BbvI | Yes(65°C) |
| BbvCI | Yes(80°C) |
| BccI | Yes(65°C) |
| BceAI | Yes(65°C) |
| BcgI | Yes(65°C) |
| BciVI | Yes(65°C) |
| BclI | No |
| BfaI | Yes(80°C) |
| BfrBI | Yes(80°C) |
| BfuAI | Yes(65°C) |
| BfuCI | Yes(80°C) |
| BglI | Yes(65°C) |
| BglII | No |
| BlpI | No |
| Bme1580I | Yes(80°C) |
| BmgBI | Yes(65°C) |
| BmrI | Yes(65°C) |
| BmtI | Yes(65°C) |
| BpmI | Yes(65°C) |
| Bpu10I | Yes(80°C) |
| BpuEI | Yes(65°C) |
| BsaI | Yes(65°C) |
| BsaAI | Yes(80°C) |
| BsaBI | Yes(80°C) |
| BsaHI | Yes(80°C) |
| BsaJI | Yes(80°C) |
| BsaWI | Yes(80°C) |
| BsaXI | No |
| BseRI | Yes(65°C) |
| BseYI | Yes(65°C) |
| BsgI | Yes(65°C) |
| BsiEI | Yes(80°C) |
| BsiHKAI | Yes(80°C) |
| BsiWI | Yes(80°C) |
| BslI | Yes(80°C) |
| BsmI | Yes(80°C) |
| BsmAI | Yes(80°C) |
| BsmBI | Yes(80°C) |
| BsmFI | Yes(80°C) |
| BsoBI | No |
| Bsp1286I | Yes(65°C) |
| BspCNI | Yes(80°C) |
| BspDI | Yes(65°C) |
| BspEI | Yes(80°C) |
| BspHI | Yes(65°C) |
| BspMI | Yes(65°C) |
| BsrI | Yes(80°C) |
| BsrBI | Yes(80°C) |
| BsrDI | Yes(80°C) |
| BsrFI | No |
| BsrGI | Yes(80°C) |
| BssHII | Yes(80°C) |
| BssKI | Yes(80°C) |
| BssSI | Yes(80°C) |
| BstAPI | Yes(80°C) |
| BstBI | No |
| BstEII | No |
| BstF5I | No |
| BstNI | No |
| BstUI | No |
| BstXI | Yes(65°C) |
| BstYI | Yes(80°C) |
| BstZ17I | No |
| Bsu36I | Yes(80°C) |
| BtgI | Yes(80°C) |
| BtgZI | Yes(80°C) |
| BtsI | Yes(80°C) |
| Cac8I | Yes(65°C) |
| ClaI | Yes(65°C) |
| CviAII | Yes(65°C) |
| DdeI | Yes(65°C) |
| DpnI | Yes(80°C) |
| DpnII | Yes(65°C) |
| DraI | Yes(65°C) |
| DraIII | Yes(65°C) |
| DrdI | Yes(65°C) |
| EaeI | Yes(65°C) |
| EagI | Yes(65°C) |
| EarI | Yes(65°C) |
| EciI | Yes(65°C) |
| EcoNI | Yes(65°C) |
| EcoO109I | Yes(65°C) |
| EcoRI | Yes(65°C) |
| EcoRV | Yes(80°C) |
| FatI | Yes(65°C) |
| FauI | Yes(65°C) |
| Fnu4HI | Yes(65°C) |
| FokI | Yes(65°C) |
| FseI | Yes(65°C) |
| FspI | Yes(65°C) |
| HaeII | Yes(80°C) |
| HaeIII | Yes(80°C) |
| HgaI | Yes(65°C) |
| HhaI | Yes(65°C) |
| HinP1I | Yes(65°C) |
| HincII | Yes(65°C) |
| HindIII | Yes(65°C) |
| HinfI | Yes(80°C) |
| HpaI | No |
| HpaII | Yes(65°C) |
| HphI | Yes(65°C) |
| Hpy99I | Yes(65°C) |
| Hpy188I | Yes(65°C) |
| Hpy188III | Yes(65°C) |
| HpyCH4III | Yes(80°C) |
| HpyCH4IV | Yes(65°C) |
| HpyCH4V | Yes(65°C) |
| I-CeuI | Yes(65°C) |
| I-SceI | Yes(65°C) |
| KasI | Yes(65°C) |
| KpnI | No |
| MboI | Yes(65°C) |
| MboII | Yes(65°C) |
| McrBC | Yes(65°C) |
| MfeI | Yes(65°C) |
| MluI | Yes(65°C) |
| MlyI | Yes(65°C) |
| MmeI | Yes(80°C) |
| MnlI | Yes(65°C) |
| MscI | Yes(65°C) |
| MseI | Yes(65°C) |
| MslI | Yes(65°C) |
| MspI | Yes(65°C) |
| MspA1I | Yes(65°C) |
| MwoI | No |
| NaeI | Yes(65°C) |
| N.AlwI | Yes(80°C) |
| NarI | Yes(65°C) |
| N.BbvCIA | Yes(80°C) |
| N.BbvCIB | Yes(80°C) |
| N.BstNBI | Yes(80°C) |
| NciI | No |
| NcoI | Yes(65°C) |
| NdeI | Yes(65°C) |
| NgoMIV | Yes(80°C) |
| NheI | Yes(65°C) |
| NlaIII | Yes(65°C) |
| NlaIV | Yes(65°C) |
| NotI | Yes(65°C) |
| NruI | Yes(65°C) |
| NsiI | Yes(65°C) |
| NspI | Yes(65°C) |
| PacI | Yes(65°C) |
| PaeR7I | No |
| PciI | Yes(65°C) |
| PflFI | Yes(65°C) |
| PflMI | Yes(65°C) |
| PhoI | No |
| PI-PspI | No |
| Pl-SceI | Yes(65°C) |
| PleI | Yes(65°C) |
| PmeI | Yes(65°C) |
| PmlI | Yes(65°C) |
| PpuMI | No |
| PshAI | Yes(65°C) |
| PsiI | Yes(65°C) |
| PspGI | No |
| PspOMI | Yes(65°C) |
| PstI | Yes(80°C) |
| PvuI | Yes(80°C) |
| PvuII | No |
| RsaI | Yes(65°C) |
| RsrII | Yes(65°C) |
| SacI | Yes(65°C) |
| SacII | Yes(65°C) |
| SalI | Yes(65°C) |
| SapI | Yes(65°C) |
| Sau96I | Yes(80°C) |
| Sau3AI | Yes(65°C) |
| SbfI | Yes(65°C) |
| ScaI | Yes(80°C) |
| ScrFI | Yes(65°C) |
| SexAI | Yes(65°C) |
| SfaNI | Yes(65°C) |
| SfcI | Yes(65°C) |
| SfiI | No |
| SfoI | Yes(65°C) |
| SgrAI | Yes(65°C) |
| SmaI | Yes(65°C) |
| SmlI | No |
| SnaBI | Yes(80°C) |
| SpeI | Yes(65°C) |
| SphI | Yes(65°C) |
| SspI | Yes(65°C) |
| StuI | Yes(65°C) |
| StyI | Yes(65°C) |
| StyD4I | Yes(65°C) |
| SwaI | Yes(65°C) |
| TaqI | Yes(80°C) |
| TfiI | No |
| TliI | No |
| TseI | No |
| Tsp45I | No |
| Tsp509I | No |
| TspRI | No |
| Tth111I | No |
| XbaI | Yes(65°C) |
| XcmI | Yes(65°C) |
| XhoI | Yes(65°C) |
| XmaI | Yes(65°C) |
| XmnI | Yes(65°C) |
| ZraI | Yes(80°C) |
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