病毒抗原

2007-10-16[求助] TGEV和PEDV病毒抗原的纯化方法

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TGEV用PK-15细胞培养,PEDV用VERO细胞培养,准备将这两种病毒纯化,用于包被ELISA板,但不知道应该如何纯化这两种病毒。特向大家请教!
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回复:时间:2007-10-17

Dot-ELISA试验将TGEV N基因在原核系统成功表达,并通过Ni-NTA柱纯化,获得纯度较高的N蛋白。纯化的N蛋白具有反应原性.可以作为诊断抗原。此法生产的抗原,避免了以活病毒作为抗原散播病毒的危险。试验证明,该方法直观效果好,用肉眼即可判定结果,无需特殊设备条件,适合于现场对该病的快速诊断和疫苗免疫效果的评价

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回复:时间:2007-10-25

如果只是包被板子做ELISA,非常简单,就是将你扩增的病毒反复冻融吹打离心,将上清用碳酸盐缓冲液做1:40稀释,直接包被。几乎所有的病毒扩增物做ELISA都通用方法。建议你尝试。如果对1:40稀释度不放心,可用有限稀释方法做滴定