4.5-15mg鼠血清IgG/ml填料，5-15mg鼠腹水IgG/ml填料

• 产品简介

蛋白G可与多数哺乳动物IgG的Fc端特异性结合。使用的rec-ProteinG是通过基因工程-重组蛋白的方法表达获得。由于重组表达的rec-ProteinG去除了除Fc端以外的其他非特异性结合位点，特异性更好。
本产品采用“高配基、高浓度、小体积”的创新偶联技术，将填料中有限的羟基(-OH)结合位点充分活化，使得单位体积中结合更多蛋白G，最终纯化效率较普通偶联有30%的提高。蛋白G偶联填料可直接用于血清、腹水中IgG抗体纯化，或用于含Fc片段的重组蛋白的纯化。

• 产品技术指标

    rec-ProteinG/Sepharose比值：2.7~3.2mgrec-ProteinG/mlSepharose
    rec-ProteinG分子量：22.5KDa
每分子rec-ProteinG可结合IgG位点数：2个
rec-ProteinG可结合白蛋白位点数：无
    线性流速：300-500cm/h
    耐压指数：≤0.3 MPa（填料）

• 注意事项

请在实验前仔细阅读本rProteinG预装柱使用说明。同时，将所要的所有试剂、耗材拿出置于室温，恢复至室温使用。

• 产品保存

产品储存于2-8℃，保质期两年。

• rec-ProteinG预装柱纯化IgG抗体步骤

以下实验方法适用于从血清或腹水中纯化IgG抗体，不同来源的IgG与rec-ProteinG的结合能力不同，具体情况请参考表1。
1. 将血清或腹水样品（推荐上样量2mL样品/mL柱）装入截留分子量3.5KDa透析带中，于4℃冰箱中对1× PBS（pH 7.4）透析过夜；
2. 将rec-Protein G-Sepharose装柱固定好，用10倍柱体积1× PBS（pH 7.4）平衡层析柱，建议流速为1 mL/min；
3.将透析好的样品从层析柱上端加入，建议流速为1 mL/min，为了获得更好的抗体结合效果可将流穿液再上样，重复2遍（或将样品1次性加入层析柱后置于摇床上，轻轻摇动，结合30min）；
4. 样品结合后，用20倍柱体积1× PBS(pH 7.4)洗涤层析柱，建议流速为1 mL/min，勿让层析柱滴干；
5. 洗脱IgG，向层析柱上端加入洗脱液（100 mM甘氨酸，pH 2.7），用预先加有100μL中和缓冲液（1MTris，pH9.0）的4mLEp管接收，2mL/管，共收集10倍柱体积，进行10%SDS-PAGE电泳，确定IgG样品所在管，回收样品。
6.用5倍柱体积再生缓冲液（100 mM甘氨酸，pH 2.0）进行再生处理，再加入10倍柱体积ddH₂O清洗层析柱。最后于层析柱中加入10倍柱体积,20% Ethanol，4~8 ℃冰箱保存处理。

 

温馨提示：不可用于临床治疗。