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流式实验中同型对照的选择方法

抗体有时会因为非特异的蛋白-蛋白相互作用结合细胞内成分,因为疏水作用结合脂肪,也可能会结合一些细胞表面的抗体受体。比如说,
IgG亚型的抗体会结合细胞表面的Fc受体,如CD16、CD32和CD64等。理想条件下,各种类型的非特异性结合都可以通过蛋白(BSA、牛奶或动物血清)来阻断。Fc受体的结合则可以通过与含免疫球蛋白的血清预孵育来阻断。所以一个抗体非特异性相互作用及与Fc受体结合的情况,都可以用无关抗原的相同亚型抗体来比照,即同型对照。那么如何选择同型对照呢?
1、一般选择与一抗的成分完全相同种属来源、相同亚型和亚链、相同荧光标记的抗体。比如抗人的CD56FITC标记的抗体,成份是MouseIgG1,κ,那么它的同型对照应该是FITC标记的MouseIgG1,κ。
2、如果抗体是组合形式,如纯化的一抗+荧光标记的二抗,那么应该选择一抗的同型对照。比如CD86的纯化抗体,成分是MouseIgG1,κ,它的同型对照是纯化的MouseIgG1,κ,它的二抗PE标记的抗小鼠IgG1。那么染色方式如下:样本管:纯化的CD86+PE标记的抗小鼠
IgG1(二抗)+样本,同型对照管:纯化的同型对照+PE标记的抗小鼠IgG1(二抗)+样本。
3、如果没有找到完全匹配的同型对照,在保持来源相同、荧光标记相同、免疫球蛋白类别相同条件下,优先选择的顺序应该是亚链不同--亚型不同。比如,某种的抗体的来源是MouseIgG2а,κ。如果找不到完全相同的同型对照,那么优先选择相同荧光标记MouseIgG2а;如果也没有找到MouseIgG2а,那么优先选择相同荧光标记的MouseIgG2b;如果最后还是没有找到MouseIgG2b,那么选择相同荧光标记的MouseIgG2作为同型对照。
以下是联科生物同型对照抗体列表,供选择。
货号 | 产品名称 | 规格 | 目录价 |
70-CH101 | HamsterIgGIsotypeControl,FITC | 20T | 400 |
70-CH104 | HamsterIgGIsotypeControl,PE | 20T | 400 |
70-CM101 | MouseIgG1IsotypeControl,FITC | 20T | 360 |
70-CM104 | MouseIgG1IsotypeControl,PE | 20T | 360 |
70-CM105 | MouseIgG1IsotypeControl,APC | 20T | 400 |
70-CM106 | MouseIgG1IsotypeControl,PE-Cy5 | 20T | 400 |
70-CM118 | MouseIgG1IsotypeControl,PE-Cy5.5 | 20T | 450 |
70-CM120 | MouseIgG1IsotypeControl,AlexaFluor?488 | 20T | 450 |
70-CM2a01 | MouseIgG2aIsotypeControl,FITC | 20T | 360 |
70-CM2a04 | MouseIgG2aIsotypeControl,PE | 20T | 360 |
70-CM2a05 | MouseIgG2aIsotypeControl,APC | 20T | 400 |
70-CM2a06 | MouseIgG2aIsotypeControl,PE-Cy5 | 20T | 400 |
70-CM2b01 | MouseIgG2bIsotypeControl,FITC | 20T | 360 |
70-CM2b04 | MouseIgG2bIsotypeControl,PE | 20T | 360 |
70-CM2b05 | MouseIgG2bIsotypeControl,APC | 20T | 400 |
70-CM2b06 | MouseIgG2bIsotypeControl,PE-Cy5 | 20T | 400 |
70-CR101 | RatIgG1IsotypeControl,FITC | 20T | 360 |
70-CR104 | RatIgG1IsotypeControl,PE | 20T | 360 |
70-CR105 | RatIgG1IsotypeControl,APC | 20T | 400 |
70-CR106 | RatIgG1IsotypeControl,PE-Cy5 | 20T | 400 |
70-CR2a01 | RatIgG2aIsotypeControl,FITC | 20T | 360 |
70-CR2a04 | RatIgG2aIsotypeControl,PE | 20T | 360 |
70-CR2a05 | RatIgG2aIsotypeControl,APC | 20T | 400 |
70-CR2a06 | RatIgG2aIsotypeControl,PE-Cy5 | 20T | 400 |
70-CR2b01 | RatIgG2bIsotypeControl,FITC | 20T | 360 |
70-CR2b04 | RatIgG2bIsotypeControl,PE | 20T | 360 |
70-CR2b05 | RatIgG2bIsotypeControl,APC | 20T | 400 |
70-CR2b06 | RatIgG2bIsotypeControl,PE-Cy5 | 20T | 400 |
全国热线:400-6721-600技术邮箱:tech@liankebio.com
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