在免疫沉淀IP&免疫荧光IF如何正确的选择Flag标签抗体？

Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统，广泛应用于Westernblotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸（Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys）组成的多肽片断。FLAG标签只有8个氨基酸组成，因此它不会占据其他表位与结合域，避免导致融合蛋白的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点，FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面，因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。

由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端，这一系统已用于各种细胞类型，包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody（货号#E022060）可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。比如在免疫荧光IF的实验里，同时配合EarthOx的Dylight549荧光二抗，使用该抗体可以准确的定位出Flag融合表达蛋白在细胞内的位置（如图红色显示部分）。另外，做融合表达分析前，通过免疫共沉淀技术获得Flag融合表达蛋白也是非常重要的一步，因此选择一个合适的、可用于免疫共沉淀（Immunoprecipitation，IP）Flag标签抗体也是很必要的。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody（货号#E022060）不仅能应用于细胞内定位的IF实验，同样还能应用于IP实验。1:200甚至更高的IP实验稀释比率，也说明了该抗体本身的具有很高的效价，同时，因为是单克隆抗体，因此特异性也很高。高效价所对应的高稀释比率也意味着超高性价比。

Flag标签抗体（#E022060）用于IF免疫荧光实验	Flag标签抗体（#E022060）用于WB实验（Line4为1:10000稀释）

除了上面所说的IP和IF实验，Flag标签抗体的基本应用还包括WB实验，EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody（货号#E022060）在该应用中同样表现优异。说明书的推荐起始稀释比例是1:1000，但在如上图所示的实验中，在1:10000的稀释比率下也表现优异（EarthOx也进行了50000次以后的稀释，仍然显示出很好的条带显示，没有在说明书里列出）。因此EarthOx的Flag标签抗体不但能通过WB实验很好的满足融合蛋白表达量的分析，并且在免疫荧光IF、免疫沉淀IP的试验中也有很好的表现，能满足Flag标签融合蛋白的细胞内定位以及纯化的需要，而且其高效价和特异性，远远比其他Flag抗体具有更高的性价比。更多该抗体的信息，请点击查看：EarthOxFlag标签抗体。

更多Flag标签抗体以及其他如His、HA、Myc、GST、GFP（如EGFP、EYFP）等其他标签抗体，请电话垂询。美国EarthOx品牌是一家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的品牌，蚂蚁淘将其引入中国，作为其中国区域代理，将为客户提供最具性价比的常规免疫学试剂，如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗，抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家国际知名品牌的的中国代理或区域代理，能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣，请致电027-84454412，或13317111952到蚂蚁淘科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。

================  蚂蚁淘在线  ================

免责声明：本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容

版权声明：未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘在线”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。