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回复:时间:2017-06-07
微光ksm 我用试剂盒提了质粒,想跑琼脂糖凝胶电泳看看质粒的纯度如何,结果Marker很清晰,但是样本一点条带都没有,孔的位置也不亮,做了两次,也加大了上样量,都没有出现条带,求朋友们指点!!!测浓度了吗?
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回复:时间:2017-06-03
1.制胶以制备50ml,1%凝胶为例,按压取1片低渗琼脂糖,放入50ml缓冲液浸泡203分钟使之完全崩解,之后操作与粉末琼脂糖相同。(注意,不需添加任何染料。)2.染色GelRedLoADIngBuffer与样品按照1:4体积比混合放置3-5分钟。3.上样样品与Marker按常规方法上样。4.电泳、成像分析同常规做法。您可关注公司网址:www.life-ilab.com
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回复:时间:2017-06-07
sicaujj这个kit提出来是用于测序的吗?浓度太低了,你要想看到条带,至少要上个5ul吧。又提了一次浓度在160多,A260峰明显,上样量9μl,还是没有条带,真的不知道哪里出了问题,高手能帮忙分析一下吗
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回复:时间:2017-06-08
展开引用微光ksm又提了一次浓度在160多,A260峰明显,上样量9μl,还是没有条带,真的不知道哪里出了问题,高手能帮忙分析一下吗......做转化后板上的菌长的正常吗?用的什么感受态?什么载体?用的什么kit提质粒的?
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回复:时间:2017-06-03
sicaujj做转化后板上的菌长的正常吗?用的什么感受态?什么载体?用的什么kit提质粒的?这个是空白质粒,别人给的菌种,是15年的,摇过夜后用康维世纪小提试剂盒提的,给的人说这次的不是很好,但还是可以跑出条带的
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回复:时间:2017-06-12
微光ksm这个是空白质粒,别人给的菌种,是15年的,摇过夜后用康维世纪小提试剂盒提的,给的人说这次的不是很好,但还是可以跑出条带的过夜培养后离心下来的菌量也很少咯?要不划线活化一下。要么把你现在的质粒拿去换一种感受态快转看看。
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