邻甲酚酞络合酮比色法测定血清总钙实验

================  蚂蚁淘在线  ================

免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容

版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。

  • 资质认证

    获得国家资质,权威认证!

  • 全国联保

    全国联保,官方无忧售后

  • 正规发票

    正规发票,放心购买

  • 签订合同

    签订合同,保障您的权益

/**/
实验方法原理邻--甲酚酞络合酮是全属洛合指示剂,同时也是酸碱指示剂,在碱性溶液中与钙及镁螯合,生成紫红色化合物。做钙测定时,在试剂中加入8-羟基喹啉以消除标本中镁离于的干扰。
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
一、实验试剂:

l.邻--甲酚酞络合酮显色剂:称取8一羟基喹啉500mg,置烧杯中。加浓HCL15ml,使其溶解并转人500ml容量瓶中,再加入邻--甲酚酞络合酮25mg,待完全溶解后,如Tritonx-10Oml混匀,然后加去离子水至刻度置聚乙烯瓶内保存。

2.lmol/LAMP碱性缓冲液:称取a-氨基-2-甲基-l-丙醇89.14g,置1L容量瓶中,加500ml去离子水溶解待完全溶解加至刻度,置聚乙烯瓶中室温保存。

3.显色应用液:应用时,根据当日标本的多少将上述两液等量混合。

4.钙标准液(2.5mmol/L):准确称取经110℃干燥12h的碳酸钙250mg,地置于1L容量瓶内,加稀盐酸(1份浓HCL加9份去离子水)7ml溶解后,加去离子水900ml,然后用500g/L醋酸铵溶液调PH值至7.0,最后加去离子水至刻度,混匀。

二、实验操作:

温匀,放5min后,分光光度计波长575nm,10mm光径比色杯用空白管调零,读取各管吸光度。

如标本混浊、黄疸、浴血、需做校正试验,于空白管及测定管中各加入5g/LEGTA溶液0.05ml再测吸光度,再次读取的吸光度差,即为校正吸光度。

三、计算:

血清钙mmol/L={[测定管吸光度(或校正管吸光度)]/标准管吸光度}×2.5

参考值:成人:2.03-2.45mmol/L

儿童:2.25-2.67mmol/L
注意事项
1.用血清或肝素抗凝血浆标本,不能用钙螯合剂(EDTANa2)及草酸盐作抗凝剂的标本。

2.邻--甲酚酞络合酮试剂灵敏度很高,所用试管和器皿如有微量的污染亦会引起测定误差,故此,测定最好用一次使用的塑料管,所用进剂应在聚乙烯瓶内保存。如果条件不允许而用玻璃试管和器皿时一定要经稀盐酸清洗,再用去离子水冲净后方可使用。