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邻甲酚酞络合酮比色法测定血清总钙实验
蚂蚁淘
/发布时间:1533580080 /浏览量:277
| 实验方法原理 | 邻--甲酚酞络合酮是全属洛合指示剂，同时也是酸碱指示剂，在碱性溶液中与钙及镁螯合，生成紫红色化合物。做钙测定时，在试剂中加入8-羟基喹啉以消除标本中镁离于的干扰。 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 试剂、试剂盒 | AMP碱性缓冲液 仪器、耗材 | 邻--甲酚酞络合酮显色剂
实验步骤 | 一、实验试剂： l.邻--甲酚酞络合酮显色剂：称取8一羟基喹啉500mg，置烧杯中。加浓HCL15ml，使其溶解并转人500ml容量瓶中，再加入邻--甲酚酞络合酮25mg，待完全溶解后，如Tritonx-10Oml混匀，然后加去离子水至刻度置聚乙烯瓶内保存。 2.lmol/LAMP碱性缓冲液：称取a-氨基-2-甲基-l-丙醇89.14g，置1L容量瓶中，加500ml去离子水溶解待完全溶解加至刻度，置聚乙烯瓶中室温保存。 3.显色应用液：应用时，根据当日标本的多少将上述两液等量混合。 4.钙标准液（2.5mmol/L）：准确称取经110℃干燥12h的碳酸钙250mg，地置于1L容量瓶内，加稀盐酸（1份浓HCL加9份去离子水）7ml溶解后，加去离子水900ml，然后用500g/L醋酸铵溶液调PH值至7.0，最后加去离子水至刻度，混匀。 二、实验操作：
如标本混浊、黄疸、浴血、需做校正试验，于空白管及测定管中各加入5g/LEGTA溶液0.05ml再测吸光度，再次读取的吸光度差，即为校正吸光度。 三、计算： 血清钙mmol/L={[测定管吸光度（或校正管吸光度）]/标准管吸光度}×2.5 参考值：成人：2.03-2.45mmol/L 儿童：2.25-2.67mmol/L 注意事项 | 1.用血清或肝素抗凝血浆标本，不能用钙螯合剂（EDTANa2）及草酸盐作抗凝剂的标本。 2.邻--甲酚酞络合酮试剂灵敏度很高，所用试管和器皿如有微量的污染亦会引起测定误差，故此，测定最好用一次使用的塑料管，所用进剂应在聚乙烯瓶内保存。如果条件不允许而用玻璃试管和器皿时一定要经稀盐酸清洗，再用去离子水冲净后方可使用。
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