方法二:细菌基因组DNA的微量提取法

本方法通过SDS裂解细胞,蛋白酶降解蛋白,CTAB去除多糖成分一:仪器:同方法一二:试剂:TE、TAE缓冲液;10%SDS;5MNaCL;20mg/ml蛋白酶K;CTAB/NaCL溶液(10%CTAB,0.7MNaCL4.1gNaCL溶于80ml水中,缓慢加入10gCTAB,加热溶解);25/24/1,酚/氯仿/异戊醇;24/1,氯仿/异戊醇;异丙醇;70%及100%乙醇三:操作1.5ml对数生长期细菌细胞离心,5000rpm,1min沉淀溶于500μlTE缓冲液中混匀30μl10%SDS,3μL蛋白酶K,混匀,37℃,1小时100μlNaCL(5M)混匀80μl的CTAB/NaCL,*混匀;65℃10min(可不做)加入等体积酚/氯仿/异戊醇混合液,混匀,离心12000rpm,4-5min取上清,以下操作与方法一中有机溶剂抽提、沉淀、干燥、除RNA、复溶等步骤一致。注意1,*此步操作后,离心管中NaCL的浓度不应低于0.5M,否则DNA将与CTAB共沉淀。2,本法适用于从多糖含量高的样品中提取DNA。对于菌体样品,通过此流程,可以获得较为完整的DNA分子。

================  蚂蚁淘在线  ================

免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容

版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。