方法三:酵母菌基因组DNA的提取

方法三:酵母菌基因组DNA的提取

一:仪器:同方法一

二:试剂:SE缓冲液(1M山梨醇,0.1MEDTApH7.5);溶菌酶(50mg/ml);20%PVP;蛋白酶K缓冲液(10mMTrispH7.60.5%SDS1mMEDTA);其余同前

三:操作

1.5ml对数生长期细菌细胞

离心,12000rpm,1-2min

沉淀

溶于590ulSE缓冲液中混匀+10ul溶菌酶37℃,1hr

离心,12000rpm,8-10min

沉淀

溶于100μL,0.5μl蛋白酶K,混匀,37℃,1hr

加入1.2ml的CTAB/NaCL,200μl20%PVP混匀65℃,30min

等体积酚/氯仿/异戊醇混合液,混匀,

离心,12000rpm,4-5min

上清,以下操作与方法一中有机溶剂抽提、沉淀、干燥、除RNA、复溶等步骤一致。

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