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Western Blot 蛋白上样缓冲液
蛋白样品制备是免疫印迹(WesternBlot)的第一步,也是决定实验成败的关键步骤之一。在蛋白提取和定量后,需要加入蛋白上样缓冲液对蛋白进行处理,使蛋白样本能在电泳中进行分离。
一般用于WesternBlot的抗体只能识别抗原蛋白中的线性序列结构表位(一级结构),因此,为使抗体能够结合该表位而需要将蛋白样品进行变性,使之打开折叠的空间结构。还原/变性蛋白上样缓冲液中含有的SDS可断裂蛋白分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,同时SDS也与蛋白疏水区结合,由于SDS带大量的负电荷,因而消除或掩盖了不同种类蛋白质间原有电荷的差异,使其均带有相同密度的负电荷。缓冲液中的强还原剂则能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂,分子被解聚成组成它们的多肽链。
某些抗体识别的表位是非连续氨基酸构成的蛋白三维结构,此种情况则需要使用非变性蛋白样品进行电泳,抗体的说明书一般会标注。非变性电泳的样品和电泳缓冲液中均不加SDS,蛋白样品也不需加热变性。有的抗体仅仅识别非还原形式的蛋白,如氧化形式(特别是半胱氨酸残基)的蛋白,此时还原剂也必须从上样冲液和电泳缓冲液中除去。
联科生物提供多种蛋白上样缓冲液,包括SDS-PAGE蛋白上样缓冲液、非变性蛋白上样缓冲液、非变性非还原性蛋白上样缓冲液。这些缓冲液均以改良的溴酚蓝为染料,5倍浓缩,即用型,使用方便,操作简单,全部现货供应。
产品列表:
厂商 | 目录号 | 产品名称 | 规格 | 目录价 |
MultiSciences | 70-WB004 | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 1ml*2 | 30 |
MultiSciences | 70-WB0041 | 非变性蛋白上样缓冲液(5X) | 1ml*2 | 30 |
MultiSciences | 70-WB0042 | 非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X) | 1ml*2 | 30 |
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