5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（5×SDS-PAGEProteinLoadingBuffer）是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。本品适用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
保存与运输方法保存：-20℃保存，至少1年有效。运输：冰袋运输。
注意事项1）本品含少量二硫苏糖醇（DTT），有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。2）本品必须完全溶解后再使用。3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤1）在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。2）取适量的蛋白样品和5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液按4:1混合，充分混匀。3）100℃或沸水浴加热3～5min，以充分变性蛋白。【注意】：如果起始细胞或组织用量较大，基因组DNA含量较高，煮沸3~5min后可能仍然比较粘稠或有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5~10min或加入适量已稀释的1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液后再煮沸3~5min。充分煮沸的目的一方面使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放，另一方面也能引起基因组DNA的部分断裂从而使得粘稠感消失，这样不会影响后续的上样操作。4）冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。5）通常电泳至蓝色染料到达PAGE胶的底部附近即可停止。
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