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2021-07-28【求助】酵母菌落和乳酸菌落的PCR

wxp
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请问哪位大侠对酵母菌落和乳酸菌落的PCR有经验？介绍一下吧，谢谢了！
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回复：时间：2006-05-01

反应体系操作如下：PCR反应体系（酶除外）＋酵母单菌落或乳酸单菌落然后沸水或者金属浴2min。接下来加入聚和酶 放入PCR 扩增 程序和普通PCR 反应相同。

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wxp
回复：时间：2006-05-07

细胞壁厚，直接加热能破壁吗？用不用特殊处理一下呀？你是这么做的吗？谢谢！

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回复：时间：2006-04-27

可以用玻璃珠破碎，效果更好一些：）

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wxp
回复：时间：2006-05-05

谢谢！哪里有卖玻璃珠的？

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回复：时间：2006-04-30

在一般的试剂公司就有卖的，不过直径大小不一样的，我们用的是100um的，是破碎阳性菌的外壁的

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wxp
回复：时间：2006-04-29

非常感谢！好人哪！

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回复：时间：2006-04-28

沸水或者金属浴2min,100度没有问题的

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wxp
回复：时间：2006-05-09

什么是金属浴？怎么做呀？谢谢啦！

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回复：时间：2006-05-09

就是一种加热工具比热水浴调节方便一样的呵呵

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wxp
回复：时间：2006-05-02

谢谢！我们都是劳动者，祝你节日快乐！

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回复：时间：2006-05-06

glassbeads＋酚氯仿法很好，votex3min,centrifuge3min,取上清1ul,可以google出来很多.

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回复：时间：2006-05-03

我一般将粘有菌落的牙签在装有15微升dd水的pcr离心管中晃动几下,而后将牙签顺序接中于另一平皿(剩下体积安10微升算),加入10微升反应mixture(MgdNTPBufferPrimerTaq),反应程序和普通一样.

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