膜片钳

2017-05-12小鼠DRG急性分离膜片钳技术求助

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新手一枚,希望大家能帮帮我,先谢谢啦

细胞状态很差,显微镜下看到的细胞大多数里面呈现颜色较深的颗粒状物质,细胞核很明显很大(如图)有做过出现这种情况的朋友么,可以帮忙分析下不
我们酶是胰酶1mg/ml和胶原酶2.6mg/ml,37℃,30min(这个条件是copy一个实验室的,他们可以做出来,但是我就做不出来
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回复:时间:2017-05-18

就是看着透明的那种,对细胞状态影响比较大的我觉得应该注意1. 玻璃片的处理,处理不好大量细胞流失2. 消化时间,过长会使得细胞很脆弱

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回复:时间:2017-05-22

展开引用zhdreamice就是看着透明的那种,对细胞状态影响比较大的我觉得应该注意1.玻璃片的处理,处理不好大量细胞流失2.消化时间,过长会使得细胞很脆弱......哈哈,我之前就是看了一个你的帖子,上面说可能是消化短的原因,最近我把时间延长了,但是效果还是不好,我要找的是DRG小细胞,但是看到的大多数都是很大的核也很明显的那种感觉快死的细胞,我要找的那种细胞很少,你的那张图是培养的细胞么?看着有轴突的

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回复:时间:2017-05-17

叶子儿yezier哈哈,我之前就是看了一个你的帖子,上面说可能是消化短的原因,最近我把时间延长了,但是效果还是不好,我要找的是DRG小细胞,但是看到的大多数都是很大的核也很明显的那种感觉快死的细胞,我要找的那种细胞很少,你的那张图是培养的细胞么?看着有轴突的这张是培养了3,4天的照片。你的是当天做吗,还是需要培养几天?你最好看看消化后,细胞悬浮液中细胞的状况,如果没问题。那就可能是你培养液或者玻璃片等的问题了

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回复:时间:2017-05-20

zhdreamice这张是培养了3,4天的照片。你的是当天做吗,还是需要培养几天?你最好看看消化后,细胞悬浮液中细胞的状况,如果没问题。那就可能是你培养液或者玻璃片等的问题了对不起,前段时间没做就忘了回复了。是当天做,悬浮液的细胞状态我没看,下次来看看,但是我感觉最大的可能还是消化问题,我想问下前辈你做的时候消化液和条件是怎么的,可以说下么