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ALA 光刺激器在电生理实验中的应用

mayitao /发布时间:1630085406 /浏览量:192

近几年光遗传学在电生理领域非常火热，在不了解它之前相信很多人会觉得很高端，很难懂。在我们了解之后会发现其实它很简单，只是一种工具的应用：

通过基因工程，科学家构建出了携带有特定种类视蛋白基因的病毒载体，用它们感染培育好的实验动物，再通过各种操作将视蛋白特异性表达在某一类神经细胞上。这样一来，一类新的转基因实验动物诞生了，它们脑内将有且仅有这一类神经细胞对光敏感。

视蛋白是一种对光敏感的独特蛋白，也就是附着于细胞膜上的光敏感离子通道，在受光刺激后打开并向细胞内运送特定的某种离子，这样一来就可以通过光刺激的手段实现对细胞的电活动加以控制。

最简单的例子，人的眼睛的视网膜上就长满了视紫红质（一种视蛋白）的视锥细胞和视杆细胞，它们接收到大自然界的光刺激后，将光线转化为电信号送到大脑，我们才看到了五彩缤纷的颜色。

正在进行实验所拍监视器上显示到的视杆细胞

正在进行实验所拍监视器上显示到的视杆细胞

从光遗传学发展以来，给光刺激的仪器就开始陆续发展。最早美国斯坦福大学所做的光遗传学实验就是通过SUTTER公司的DG-4光源来给光刺激，直接通过显微镜的物镜给光刺激。

到今天，这种方法仍然是给光刺激的手段之一，它的优点是通过光栅光源+物镜可以给出想要的任何波段的光，且光斑大小可以通过聚焦的方式调节。而目前通过物镜给光也可以直接先确定好需要哪种波段的光，购置一套CoolLED的光源加载在显微镜上，这样的方式在性价比就显得非常高了。

上述的这种采用冷光源结合显微镜物镜给光的方式已经见于很多实验室。作为光刺激，确实是比较好的方式方法。图中的这种CoolLED光源是英国Scientifica公司的产品。目前也有其他公司的类似产品，也有国产的类似产品。其原理简单，价格相对也不贵。

下面言归正传，详细介绍一下东乐自然基因公司所代理的ALA公司的光刺激器。下图为光刺激的主机部分：光源。

在LIGHTOUTPUT下面是一个lightguide，这是一个光纤接口，通过它来连接光纤。光源内部可以装置三种颜色的灯泡，465nmBlueLED520nmGreenLED624nmAmberLED。

需要注意的是：此光源内只能安装一种颜色的灯泡，比如已经安装了蓝光的灯泡，如果需要使用其他两种颜色的光的时候，需要拆卸这个光源的盒子，更换其他颜色的灯泡。而这个工作是非常简单的。

光纤的另外一端连接到Axon探头上安装的这个很特别的holder上

下面来聊聊这个特殊的holder：

我们在膜片钳实验中用到的holder，也就是Axon公司的holder，型号：1-HL-U。它是一个直的，没有分支的holder，相信大家都应该见过。而这种特殊的holder是专门为了光刺激实验所涉及。多出一个支路，是专门提供给光纤使用的。

该holder前面细长的光纤是holder本身自带的。在使用时只需将holder安装在探头上，然后将黑色的光纤插入到holder的分支处即可。

此部分可以看到蓝色光纤的前面有一小段银色部分。这个就是银丝（记录电极）。

在holder上套上拉制好的玻璃电极，光刺激与信号记录就合二为一了。在电动微操精密的移动下，这样以来记录电极与光刺激所在的位点达到了高度的一致性。即记录的点位即是光刺激的点位。

在价格上，对比Thorlabs和国产的光刺激器，价格相差不大，都在2000-3000美金之间。而国产的明显差很远，Thorlabs的核心产品也不在这一块。

核心之处也就是这个特别的holder，光刺激器与电生理实验，特别是脑片膜片钳实验息息相关。东乐自然基因生命科学公司在电生理领域经营多年，在全国拥有广泛的用户群体，欢迎广大实验室工作人员及经销商来电咨询。

编辑：wch吴春晖

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