流式细胞仪

2021-07-22流式细胞仪测细胞周期图怎样分析

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(1)细胞培养取对数生长期的细胞,按1X106个/mL以1mL体积接种于6孔板内。培养24h后,加入不同浓度样品。在37 ℃、5 % 的CO2恒温箱中培养24h后终止。(2)细胞固定胰酶消化并离心收集细胞(800rpm/min),弃上清,用预冷PBS洗细胞两次,加入预冷70%乙醇, -20℃固定保存。(3) 细胞染色离心收集细胞(800rpm/min),以1mL的PBS洗细胞一次,加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭(PI),100ug/mL RNase A, 4℃避光孵育20分钟。(4)检测以标准程序用流式细胞仪检测,汞激发波长488nm,计数8千个细胞,结果用软件WinMDI Version 2.9分析。