克隆试剂盒

【正品直销,售后保障】(入门克隆试剂盒)ClonExpress Entry One Step Cloning Kit

隆如此简单!

ClonExpress® EntryOneStepCloningKit

 

● 简单、快速、高效

● 可高效克隆50bp~10kb片段,克隆效率可达100cfu/ngVector

● 含3-dA末端的PCR产物或平末端PCR产物均可直接克隆,无需额外的加dA步骤

● 反应体系内无连接酶,自连背景极低,阳性率可达95%以上

● 重组反应具有严格的方向性,克隆产物方向确定

 

 

 

 l 广泛的体系兼容性

图1.ClonExpress.EntryOneStepCloningKit兼容常规PCR体系PCR产物可不经纯化直接进行克隆。使用Phanta、PhantaEVO、PhantaMax、Taq、TaqPlus、AceTaq、LAMP七种聚合酶扩增1kb插入片段,扩增产物直接克隆至CEEntryVector,重组产物转化XL10化学感受态(#C503,Vazyme)。各种产物克隆效率如图所示。 

 

 

 

 

 

 

 

 

l 宽广的模板量兼容范围

图2.ClonExpress.EntryOneStepCloningKit能够高效克隆50bp-10kb片段

扩增1kb、2kb、5kb、7.5kb、10kb五个插入片段,纯化后克隆至CEEntryVector,重组产物转化XL10化学感受态(#C503,Vazyme)。

 

 

 

 

l 出众的克隆阳性率

图3.因ClonExpress.Entry重组反应体系中无连接酶存在,所以几乎存在载体自连背景,克隆阳性率可超过95%。

分别克隆1kb、2kb、5kb、7.5kb、10kb五个插入片段至CEEntryVector,重组产物转化后各平板分别挑取50个克隆进行菌落PCR鉴定,不同长度插入片段克隆阳性率如图所示。

 

 

 

 

 

      ClonExpress® EntryOneStepCloningKit是在ClonExpress® 基础上研发而成的一种新型的入门克隆试剂盒。使用时需在目标DNA扩增引物5-端添加15bp固定序列以实现扩增产物与试剂盒配套克隆载体CEEntryVector末端的同源性。将目标DNA扩增产物和试剂盒配套载体混合后,仅需反应30min即可直接进行转化,完成克隆。反应过程中,同源重组酶Exnase® Entry会催化扩增产物和克隆载体的高效环化,效率可达100cfu/ngVector,克隆阳性率可达95%以上。与TA克隆相比较而言,ClonExpress® Entry一步法入门克隆技术具有适用性更广、效率更高、克隆长度更长、流程更简单等诸多优势。

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