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用缓冲液将血液转移入50ml离心管定容至45ml;400g室温离心5min后,去除上清;加入红细胞裂解液至45ml,翻转孵育8min;400g离心5min后去上清;重复裂解1次后,加入洗液至45ml,重悬细胞后计数。细胞400g离心5min后,去上清;所得细胞按107白细胞/20ul磁珠比例与Miltenyi磁珠混合,4℃孵育15min;将细胞悬液加入已润湿的LS柱,在强磁场作用下收集未吸附的CD45-细胞组份(含CTC),用3ml洗涤液洗涤柱子,共洗涤3次。所收集的细胞经离心滴加于载玻片上,置于超净台中干燥。加入2%多聚甲醛固定40min,PBS冲洗、晾干,-20℃保存备用。
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