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我想要定量血浆miRNA，目前用的方法就是Qiagen公司的血浆提取、逆转、SYBGreenPCR试剂盒，引物也是qiagen,目前做出来的结果不是很理想，公司不提供引物序列，只有miRbase上的参考序列，想要证明引物序列、扩增产物是否是我们想要的，有人推荐设计Tapman探针，再做PCR，对比SYBGreenPCR结果，从而来看引物特异性。我的问题是：这样对比有意义吗？我问过很多公司做tapman只合成不设计，要自己提供序列，可我只有数据库中的参考序列，如果我自己有序列了不就可以合成特异引物，为啥要用tapman探针来验证呢？求专业人士答疑解惑！谢谢
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