DescriptionInvitrowholecellassayby[H3]HypoxanthineuptakeassayProcedure[H3]Hypoxanthineuptakeassay(withrespecttoredbloodcellculturesofP.falciparumDispense25ulcompleteRPMIindifferentwells(triplicateforeachdrugconcentration)Dispense25ulofdrugwithunknownantimalarialactivityconcentrationrange1-10uMinthesewellsAdd200ulofparasitizedRBCtoallwells(1.7%hematocrit)Incubateat37Cfor24hoursAdd25ul[H3]hypoxanthine(0.5mCi)solutiontoeachwellIncubatefornext18hoursHarvesttheplateusingMASHtypeharvesterAllowfilterstripstodry,cutoutfilterdisksandplacethedisksintoscintillationvials(withscintillationfluid)CountactivityinaliquidscintillationcounterTheconcentrationresponsedataarefittedtoasigmoidfunctionusingcomputerizednonlinearregressionanalysis(Rodhardetal,1980)(ControlwellswithnodrugaswellasnonparasitizedRBCarealsotakeninthesamemicrotiterplate)

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