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2021-08-11（请教）关于电泳后凝胶直接做抗原免疫动物的问题

phaby
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我查了一些资料，说可以蛋白电泳后直接切下蛋白条带，加佐剂乳化后免疫动物。可是文献没有详细说明，是否拿纯化后的蛋白电泳跑胶，还是可以表达的产物（我用的是大肠杆菌的表达系统，非融合蛋白）直接跑胶？
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回复：时间：2004-07-11

大肠表达要看未诱导时是否在目的蛋白位置有条带，如果没有与目的蛋白大小相等的细菌内源蛋白出现，可以不必纯化蛋白，表达产物进行SDS－PAGE后，切下目的条带，冰上研磨后加佐剂混合均匀，也可不加佐剂，PAGE本身就是佐剂，但加佐剂效果好一些；切胶尽量切得准一些，宁缺勿滥，可以制备一块厚胶，配制5×loading buffer，可以增加上样量。

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