上海远慕生物详细为您讲述小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒样本处理，信息说明及其他咨讯，本司的ELISA试剂盒品种齐全，提供免费代测服务，除了ELISA试剂盒外我们还有生化试剂，化学试剂，培养基，抗体，动物血清，标准品，对照品，溶液，实验耗材，染色液，缓冲液，蛋白质，维生素及其他试剂等，欢迎订购！

小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒样本处理

【信息说明】

中文名：小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒

别名：小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISAKit

供应商：上海远慕

规格：48t/96t

保存：2-8℃

有效期：6个月

适用范围：科研实验等领域科研研究，不得用于临床诊断。

用途:用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。

特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。

引起ELISA测定错误结果的原因主要有：

①标本因素；

②试剂因素；

③操作因素。

【样本处理】

包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1、血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2、血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3、尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4、细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5、组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

【操作步骤】

1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

5、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

6、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

7、终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

【注意事项】

1、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

2、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

8、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

9、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

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