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硅烷化玻璃器皿
一
.
实验原理
玻璃表面存在硅醇基团
(Si-OH)
,可对蛋白质等样品产生吸附,造成样品损
失。该类基团可用硅烷化法进行封闭处理,通过硅烷化试剂二甲基二氯硅烷或
六甲基二硅胺与载体表面进行反应,除去该类基团的氢键结合能力,以改善载
体表面的性能,减少对样品的吸附。在处理低浓度的特别“黏”的溶解物如单
链核酸或蛋白质时尤其重要。
二
.
试剂器材
-
氯三甲基硅烷或二氯二甲基硅烷
-
真空泵
-
干燥器
三
.
操作步骤
方法一:
1.
配制含
6%
二甲基二氯硅烷的甲醇溶液
(
硅烷化剂
)
;
2.
将玻璃器皿洗净
(
建议用重铬酸钾洗液浸泡清洗
)
、干燥;
3.
在通风橱内将硅烷化剂倒入玻璃器皿内,使其接触器皿内表面并停留
10sec
以上。期间搅拌或振荡可使硅烷化剂与玻璃的反应更完全和均
匀;
4.
倒去硅烷化剂,用甲醇洗去过量的硅烷化剂,将玻璃器皿自然晾干,然
后
100
℃加热
1hr
。
方法二:
1.
在通风橱内将要硅烷化的玻璃器具或仪器和装有
1-3ml
氯三甲基硅烷或
二氯二甲基硅烷的烧杯放入干燥器内。
氯三甲基硅烷和二氯二甲基硅烷蒸气有毒性且高度易燃。也可用溶于易挥发
的有机溶剂
(
如氯仿或庚烷
)
中的约
5%
的二氯二甲基硅溶液简要地冲洗,或
浸透其中,有机溶剂蒸发使二氯二甲基硅沉积在器具表面。
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