硅烷化玻璃器皿

.

实验原理

玻璃表面存在硅醇基团

(Si-OH)

,可对蛋白质等样品产生吸附,造成样品损

失。该类基团可用硅烷化法进行封闭处理,通过硅烷化试剂二甲基二氯硅烷或

六甲基二硅胺与载体表面进行反应,除去该类基团的氢键结合能力,以改善载

体表面的性能,减少对样品的吸附。在处理低浓度的特别“黏”的溶解物如单

链核酸或蛋白质时尤其重要。

.

试剂器材

-

氯三甲基硅烷或二氯二甲基硅烷

-

真空泵

-

干燥器

.

操作步骤

方法一:

1.

配制含

6%

二甲基二氯硅烷的甲醇溶液

(

硅烷化剂

)

2.

将玻璃器皿洗净

(

建议用重铬酸钾洗液浸泡清洗

)

、干燥;

3.

在通风橱内将硅烷化剂倒入玻璃器皿内,使其接触器皿内表面并停留

10sec

以上。期间搅拌或振荡可使硅烷化剂与玻璃的反应更完全和均

匀;

4.

倒去硅烷化剂,用甲醇洗去过量的硅烷化剂,将玻璃器皿自然晾干,然

100

℃加热

1hr

方法二:

1.

在通风橱内将要硅烷化的玻璃器具或仪器和装有

1-3ml

氯三甲基硅烷或

二氯二甲基硅烷的烧杯放入干燥器内。

氯三甲基硅烷和二氯二甲基硅烷蒸气有毒性且高度易燃。也可用溶于易挥发

的有机溶剂

(

如氯仿或庚烷

)

中的约

5%

的二氯二甲基硅溶液简要地冲洗,或

浸透其中,有机溶剂蒸发使二氯二甲基硅沉积在器具表面。

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