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LOVO细胞培养步骤(供应LOVO细胞株)
LoVo细胞株:人结肠癌细胞系培养条件货号:GD-C8618627细胞来源:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)产品规格:≥1*10(6)/ml安全级别:1物种来源:人源或鼠源等细胞形态:上皮细胞样/成纤维细胞样/淋巴母细胞样等细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。细胞特性:贴壁/悬浮等细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等污染物培养条件:详见细胞说明书传代方法:建议1:2-1:3传代;两天换液一次(具体详细询问公司细胞培养专家)2-Anilino-4,6-di(4-Morpholinyl)-1,3,5-triazine,97%Boc-D-Phg-OHPHTHALICACIDDISODIUMSALT(+)-alpha-Methoxy-alpha-(trifluoroMethyl)phenylaceticAnhydride,95%6,7-DichloroquinoxalineALPHA-FLUOROPHENYLACETICACIDMETHYL2-OCTYNOATE2-Amino-3-picolinePolyvinylpyrrolidone-iodinecomplex4-Bromo-2-fluorobenzylalcohol3,3,4,4-Tetrachlorosulfolane1-(2-METHOXYPHENYL)ETHANOLUndecanedioicacidMinoxidilsulphate2,4-Dichlorophenylhydrazinehydrochloride2-AMinoethylhydrogensulfate2,6-DifluorobenzylChloride2-(4-BroMophenylsulfonaMido)aceticacidSodiuMMethoxide,pure,5.4M(30wt.%)solutioninMethanolL-Thyroxine4-Butoxyphthalonitrile1-bromo-4,4,4-trifluorobutane8-Hydroxy-5-nitroquinoline4-hydroxy-3-nitrobenzenesulphonicacidbenzylsulfamide2-BromobutyricacidMethylthioglycolate3-(2-AMinoethyl)-5-MethoxyindoleYttriuM(III)perchlorate,50%w/waq.soln.,ReagentGradeBenzylchloroforMate,95%,stab.withca0.1%sodiuMcarbonate4-NitrobenzophenoneN,N-DibenzylhydroxylaMineALPHA-ACETYL-ALPHA-METHYL-GAMMA-BUTYROLACTONETETRAISOBUTYLENE2-Chloro-6-hydroxynicotinicacid3-(trans-4-HydroxycyclohexylcarbaMoyl)phenylboronicacid3,4-Dimethoxybenzoylchloride2-Bromo-4-methylbenzoicacid4-EthylphenylhydrazinehydrochlorideTetraphenylcyclopentadienone4-BROMO-3-(TRIFLUOROMETHYL)BENZENESULFONAMIDE3-(2-CHLORO-PHENYL)-PYRROLIDINE2,3-DicyanonaphthaleneACETYLTHIOCHOLINEIODIDEFuran-3-boronicacid2-AMino-4-MethylpyriMidine(R)-2-IsopropylaMino-2-phenylethanol4-BroMo-5-fluoro-2-nitroaniline5-Methyl-3-phenyl-4-isoxazolylboronicacid,97%,MaycontainvaryingaMountsofanhydrideMETHYLPURPLENerolidol(cis-andtrans-Mixture)tert-butyldiphenylphosphineHydroxyquinolinecarboxylicacid;98%4,5-Dihydroxynaphthalene-2,7-disulfonicacid,disodiumsaltdihydratemethyltetracosanoate(+)-DiisopinocampheylchloroboraneDiethylisocyanatidophosphate4-Fluoro-3-(trifluoroMethoxy)benzaldehyde,97%Methylglyoxal1,1-diMethylacetalDimethoxydi-p-tolylsilane1-Boc-3-methanesulphonyloxypiperidine1-(3-Chlorophenyl)-4-(3-chloropropyl)hydrochloride,97%Phosphoramidondisodiumsalt(2,6-Dimethyl-4H-pyran-4-ylidene)malononitrile2H-PYRAZOLE-3-CARBALDEHYDEn-PropylnitrateDiiodomethane3,5-DiMethylpiperidine(S)-β-Hydroxy-γ-butyrolactone1-PentynylIodide(1S)-(-)-alpha-Pinene,98%4,6-DichloropyriMidine,97%BasicGreen14-Sulfo-2,3,5,6-tetrafluorobenzoicAcidN-ethyl-2-(isopropyl)-5-methylcyclohexanecarboxamideClosantelSodium5-Chloropyrazine-2-carboxamideCarboxyethylgermaniumsesquioxideREG1αELISAKitMouseInterleukin4,IL-4ELISAKitHumantumorangiogenesisfactors,TAFELISAKitCLL1ELISAKitCC16ELISAKitBcl2-L-1/Bcl-XELISAKitTFELISAKitHumanComplementfragment3brccptor,C3bRELISAKitHumanROLTELISAKitALDELISAKitM17AgarDesoxycholateAgarPropyleneglycolalginateRIBONUCLEICACIDSODIUMSALT5-Methylquinoxaline,98%2-METHOXY-1,4-NAPHTHOQUINONE1-bromo-4,4,4-trifluorobutanem-acetylaminoacetophenoneDL-CalciumPantothenateMagnesiummethoxidePeriacidTungstentrioxideThioacetaMide2-(1-Piperidinyl)acetaMidoxiMe,97%Methyl2-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydronaphthalene-1-carboxylate,97%AMrinoneApicidinFastYellowGMethyl3-iodobenzoate2-HydroxyMethyl-18-crown-6,97%1-(2-Ethoxyphenyl)Hydrochloride1,3-Thiazole-2-carbonylchlorideGold(I)iodide,99%(99.9+%-Au)3-Bromo-5-ethoxy-4-hydroxybenzaldehydeMethylN-(2-chloroacetyl)carbamate
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