T4 RNA Ligase 2

T4 RNA ligase catalyses the formation of a phosphodiester bond between a 5′ phosphate and 3′ hydroxyl of RNA. It is most active in sealing nicked double-stranded RNA but it will also join the ends of single-stranded RNA and can ligate the 3′ hydroxyl of RNA to the 5´ phosphate of DNA in a double stranded form. The enzyme requires ATP unless the 5’ end of the substrate is preadenylated.

inspiralis高/中通量拓扑异构酶测定John Innes中心的A. Maxwell教授和Inspiralis员工在实验室中开发了一种基于高通量微量滴定板的测定法。基于这样的事实，即负超螺旋质粒比松弛质粒更容易形成分子间三链体DNA。该测定法克服了基于凝胶的测定法的一些问题，这些问题很费时，因此固有地是低通量的。Inspiralis能够提供此测定方法，作为筛选化合物对拓扑异构酶（包括促旋酶，topo IV和人topos I和II）的抑制活性的手段。该测定法适用于改变DNA超螺旋的其他酶，例如限制酶。该测定与常规基于凝胶的测定比较的一些结果如下所示。该测定法对化合物的筛选特别有用，也可用于测定IC 50  值。在以下给出的实施例中，比较了基于板和凝胶的测定法对陀螺IV和人topo I和II对陀螺酶抑制超螺旋和松弛的IC 50值的确定。 在两种测定中均获得了相似的抑制谱和IC 50值。