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As a T-cell independent carrier (TI carrier), coupling Ficoll with haptens has been shown to produce robust antigen-specific primary immune memory1. Our method for amino functionalization yields stable primary amine groups. We carefully control the amine:polymer ratio and process to remove excess amine reagent. Custom Ficoll preparations are available upon request. GE Healthcare’s trademark Ficoll is a highly branched, 400kDa, hydrophilic polysaccharide widely used for blood separation.
1. Inman, JK, Thymus-independent antigens: The preparation of covalent, hapten-Ficoll conjugates. J Imm. 114:705, 1975.
CRM 优于 KLH 作为载体蛋白 197,使用 Fina Biosolutions 的 CRM,EcoCRM 改善免疫应答和疗效。197®钥孔血蓝蛋白 (Keyhole limpet hemocyanin,KLH) 因其极强的免疫原性和易于获得而常被用作载体蛋白。然而,由于其多丝起源和较差的表征,天然 KLH 不是理想的载体。相比之下,遗传解毒的白喉毒素 CRM 是 58.4 kDa 的重组蛋白,也具有高度免疫原性。通过 MALDI-TOF 质谱可以很容易地表征药物和肽 CRM 偶联物。我们的研究表明,用 Fina Biosolutions 的 CRM,EcoCRM 制成的结合物的免疫原性等于或优于 KLH 的结合物。®197 197 作为一种极大的外源蛋白,KLH 诱导自身和与其连接的分子产生极高的抗体滴度。然而,KLH 是从海蜗牛的血液中获得的,使得规模扩大和临床使用具有挑战性。它是一种混乱的、有点不明确的聚合蛋白,这使得很难对其进行表征。此外,KLH 在低盐和中性 pH 溶液中的溶解度较差,KLH 结合物的质量控制存在问题。目前尚无使用 KLH 作为载体蛋白的许可疫苗。相反,CRM 是一种基因解毒的白喉毒素,在细菌中重组产生,为 58.4 kDa 的定义明确的蛋白。CRM 用于多种许可疫苗,包括 Prevnar。Fina Biosolutions 开发了一种独特的大肠杆菌菌株,其以高产率将 CRM 表达为一种可溶性、适当折叠的细胞内蛋白。该蛋白以大肠杆菌 CRM 的商品名“EcoCRM”上市。EcoCRM 可用于研究和临床。