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제품특징
□ 내용 (25 ㎕반응, 100회)
1. Retrovirus Primer Mix for Provirus (각 10 pmol/㎕) | 50 ㎕ |
2. Retrovirus Probe for Provirus (10 pmol/㎕)* | 50 ㎕ |
3. hIFNg Primer Mix for Provirus, Human (각 10 pmol/㎕) | 50 ㎕ |
4. hIFNg Probe for Provirus, Human (10 pmol/㎕)* | 50 ㎕ |
5. DNA Control Template for Provirus, Human (200 pg/㎕) | 15 ㎕ |
6. EASY Dilution (Real Time PCR 용) | 1 ㎖×4 |
*형광 표식 probe (FAM)는 차광한다.
□ 보존 -20℃
□ 제품설명
Provirus Copy Number Detection Primer Set, Humanfor (Real Time PCR)은 MLV (murine leukemia virus) 유래의retrovirusvector를 매개로 인간 정상세포*에 유전자를 도입할 때, Real Time PCR법으로 provirus copy 수를 측정하는제품이다. Provirus는 retrovirus genome이숙주세포의 genome에 포함된 상태이며, 세포 내에서retrovirus genome은 숙주의 DNA 유전자에 삽입되어 provirus가 된다.본 제품은 CycleavePCR Core Kit (Code CY501)와 함께 사용하여유전자가 도입된 인간 정상세포의 genome DNA로부터 proviruscopy 수를 측정할 수 있다. 또한 MLV의packaging signal 부분을 증폭대상으로 하고 있어 거의 모든 MLV 유래의 retrovirus vector를 매개로 유전자 도입한인간 정상세포의 provirus copy 수를 측정할 수 있다.Provirus copy 수를 측정하는 방법으로 유전자 도입한 세포에서 Southernblotting 으로 평균 provirus copy 수를 산출하는 방법이 있지만, 평균 provirus copy 수를 산출하기 위해서는 다수 클론으로 Southern blotting 해야 하기 때문에 많은 노력과 시간이 필요하다.본 제품을 사용하면 세포를 복제화하지 않고 편리하게 평균 provirus copy 수를산출할 수 있다. 함께 사용하는 CycleavePCR Core Kit는특이성이 높은 cycling probe를 위한 Real TimePCR Kit이며 genome DNA의 백그라운드를 억제하며 타겟을 정확하고 간편하게 정량할수 있다.
□ 이외에 필요한 시약
CycleavePCR Core Kit (TaKaRa Code CY501)[주의]본 set는 유전자가 도입된 인간 세포용으로 다른 세포에는 사용할 수 없습니다. 또한, 정상세포 등 상염색체가 이배체인 것에 한정합니다.