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제품특징
* 본 제품의 제품명은 TB Green™으로 사전 예고 없이 변경될 수 있습니다.
□ 제품설명
EpiScope MSP Kit는 MSP (Methylation Specific PCR) 전용 PCR 시약이다. MSP에서는 bisulfite 처리에 의해, CpG 배열의 메틸화에 따라 배열이 바뀌는 염기 부위에 메틸화 DNA 검출용 프라이머(M Primer)와 비메틸화 DNA 검출용 프라이머(UM Primer)를 설계하여 PCR를 실시한다. 본 제품은 bisulfite 처리된 uracil을 포함한 DNA를 주형으로 고효율 증폭이 가능한 전용 효소와 최적화된 버퍼에 의해 높은 효율로 증폭이 가능하므로, 종래의 PCR 시약과 비교해 명확한 DNA 메틸화/비메틸화 배열 구분이 가능한 MSP 해석을 실시할 수 있다.Real Time 모니터링에 적절한 농도의 TB Green™를 포함한 상태로 반응이 최적화 되어 있어 Real Time PCR 검출(semi-quatitative 해석도 가능) 및 end-point 검출(일반 PCR을 이용한 반응으로 전기 영동으로 증폭을 확인) 양쪽 모두를 같은 반응 조건으로 검출할 수 있다.
□ 내용 (200 회, 50 μl 반응시)
| 2×MSP Buffer (Mg2+ plus, dNTP plus)*1 | 1 ml×5개 |
| MSP Enzyme | 240 μl |
| 100×TB Green™ | 100 μl |
| ROX Reference Dye(50×conc.)*2 | 200 μl |
| ROX Reference Dye II(50×conc.)*2 | 200 μl |
*1Mg2+ 농도는 4 mM(2×), dNTP 농도는 400 μM(2×).*2Applied Biosystem PCR 장치 등 well 간의 형광 시그널의 보정이 필요한 장치로 검출하는 경우에 사용한다. Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System에는 ROX Reference Dye를, 7500 및 7500 Fast Real-Time PCR System에는 ROX Reference Dye II를 이용한다. Thermal Cycler Dice Real Time System II(제품 코드 TP900)등의 Real Time PCR PCR 장치나 전기 영동에 의한 해석을 실시하는 통상의 PCR 장치를 사용하는 경우는 필요없다.
□ 보존 20℃
100×TB Green™, ROX Reference Dye, Dye II는 반드시 차광 해 주세요.
□ 비고
Real Time PCR 검출 및 end-point 검출은 같은 반응액 조성, 같은 PCR 조건으로 반응을 진행한다. end-point 검출의 경우에도 반드시 100×TB Green™를 첨가한다.
□ 사용상의 주의
TB Green™는 핵산과 결합하는 성질상, 돌연변이의 가능성이 있습니다. 또, DMSO 용액을 포함하고 있으므로, 조직 중에 색소가 침투할 우려도 있기 때문에 사용시 반드시 장갑을 착용해 주세요.
